客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

普利茅斯沙雷氏菌拉丁属名: Serratia plymuthica

志贺氏菌拉丁属名: Shigella dysenteriae

赭鳞蘑菇用途: 食用菌、药用

俄勒冈灵芝拉丁属名: Ganoderma oregonense

苜蓿中华根瘤菌拉丁属名: Ensifer meliloti

扣囊复膜孢酵母拉丁属名: Saccharomycopsis  fibuligera

小马勃注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

灰黄浅黄酵母拉丁属名: Chrysozyma griseoflava

贝氏葡萄座腔菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

拟鹫峰假丝酵母拉丁属名: Candida pseudojiufengensiss

枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis

红色蜡蘑注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

粘质沙雷氏菌拉丁属名: Serratia  marcescens

食砜节杆菌拉丁属名: Arthrobacter sulfonivorans

球孢枝孢拉丁属名: Cladosporium  sphaerospermum
高首鲟虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr412) 磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl 规格 0.1ml

HRP稳定剂 10ml/100ml pH7.2，无蛋白成分

VPREB1 英文名称： B淋巴细胞前体蛋白1 0.2ml

phospho-Dnmt1(Ser732) 英文名称： 磷酸化DNA甲基转移酶1 0.1ml

Anti-AIF 调亡诱导因子Multi-class antibodies规格： 0.1ml

ETNK2 英文名称： 乙醇胺激酶2 0.2ml

神经细胞粘附分子配体1 Anti-CD171/NCAM-L1 0.1ml

CD28 英文名称： CD28 0.1ml

Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies规格： 0.1ml

CCSA-3(Human colon cancer-specific antigen-3) ELISA kit 人专一抗原3Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-HCFHrp/BTA 膀胱抗原Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MIP-1 Beta/CCL4 巨噬细胞因子1β  MIP-1β 规格 0.1ml

ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit 人间变性激酶 96T

RING finger protein 189 英文名称： 环指蛋白189 0.2ml

Anti-Casein 酪蛋白Multi-class antibodies规格： 0.2ml

鱼孕激素/孕酮（PROG）ELISA试剂盒 英文名称：PROG ELISA Kit 特价供应

规格:5*96孔圆环病毒IgGELISA试剂盒英文名称：Elisa特价供应

植物25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 英文名称：Plant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 特价供应

植物赤霉素（GA） ELISA试剂盒英文名称：Plant Gibberellic Acid,GA ELISA Kit特价促销

植物钙调素(CAM)ELISA试剂盒 英文名称：Plant calmodulin,CAM ELISA Kit 进口/原装

TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 坏死因子α诱导蛋白1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

CRYZL1 英文名称： 醌氧化还原酶样蛋白1 0.2ml

Anti-GRP78 葡萄糖调节蛋白78(热休克蛋白70蛋白5)Multi-class antibodies规格： 0.1ml

IP-10/CXCL10(Human interferon-inducible protein 10) ELISA Kit 人干扰素诱导蛋白10Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-CXCL13/BCA1 B-淋巴细胞趋化因子Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的小鼠抗豚鼠IgG 规格 0.1ml

VCL(Human vinculin) ELISA Kit 人纽蛋白 96T

Phospho-Raptor (Ser792) 英文名称： 磷酸化mTOR相关调控蛋白 0.1ml