PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

灰平链霉菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

孢囊放线菌用途: 代谢产物具有抗菌活性。

立枯丝核菌拉丁属名: Thanatephorus cucumeris

PET-22b拉丁属名: 宿主：DH5α，BL21

依利诺斯类芽胞杆菌拉丁属名: Paenibacillus illinoisensis

枯草芽孢杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

宇佐美曲霉拉丁属名: Aspergillus  usamii

新型隐球酵母原变种拉丁属名: Cryptococcus neoformans var.neoformans

金黄杆菌属拉丁属名: Chryseobacterium balustinum

榛色假单胞菌拉丁属名: Pseudomonas  avellanae

地衣芽胞杆菌用途: 杆菌肽A产生菌

小孢根霉华变种拉丁属名: Rhizopus microsporus var. chinensis

绿色木霉用途: 产纤维素酶。

普通裂褶菌用途: 资源真菌

酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
韦塞尔斯布朗病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 人28S抗核糖体(28S rRNP)ELISA试剂盒 英文名称：Human 28S ribosome RNP antibody,28S rRNP ELISA Kit特价促销

HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16) 人类状瘤病毒16抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-ABCF1 ATP结合盒蛋白家族GCN20F家族1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-CHK2 (Thr387) 磷酸化细胞周期检测点激酶2 规格 0.1ml

兔抗大鼠IgG血清 0.5ml 国产

WISP2 英文名称： 结缔组织生长因子样蛋白 0.2ml

Phospho-DOK2 (Tyr299) 英文名称： 磷酸化D酪酸激酶衰减蛋白2 0.1ml

CD276 英文名称： CD276 0.2ml

Anti-Phospho-Jak3 (Tyr980/981) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Anti-MRAS/Mras/FITC 荧光素标记原癌基因M-rasIgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-Tubulin- Beta/FITC 荧光素标记微管蛋白IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh 5-HTR1A 5-羟色胺受体1A 规格 0.1ml

Mouse Anti-rat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

RNF27 英文名称： 环指蛋白27 0.2ml

c-Myc tag 英文名称： c-Myc tag标签 0.1ml

anti-CXCL10/Gamma-IP-10 CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10Multi-class antibodies规格： 0.2ml

CD54 ICAM-1 (Intercellular dhesion molecule 1; CD54 Anti-gen;) 细胞间粘附分子-1(多肽抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Phospho-CD18 (Ser756/Thr758/759) 磷酸化整合素β2Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PANK2 泛酸激酶2 规格 0.2ml

SERPINF2 Kit Human 人 SerpinF2 ELISA配对 ELISA

TNFSF4 英文名称： 坏死因子配体超家族成员4 0.1ml

CRY2 英文名称： 隐花色素蛋白2 0.2ml

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irGH(Human Immunoreactive growth hormone) ELISA Kit 人免疫反应性生长激素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-LEF-1 淋巴增强因子-1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh KMT3B/NSD1/ARA267 组蛋白甲基化KMT3B(雄激素受体激活蛋白) 规格 0.2ml

IL-6 ELISA KIT 大鼠白介素6 96T

Phospho-PLC γ1 (Tyr783) 英文名称： 磷酸化磷酯酶Cγ1 0.1ml