上海联祖生物科技有限公司
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蛤弧菌探针法荧光定量PCR试剂盒
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR4241
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2024-09-19
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR4241
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

英文名称

货号

蛤弧菌探针法荧光定量PCR试剂盒

Vibrio tapetis

LZR4241

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

猪链球菌拉丁属名: suis

假单胞菌用途: 微生物肥料

橡胶疫霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

地衣芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus  licheniformis

克鲁维尼尔巴克利酵母拉丁属名: Buckleyzyma kluyveri-nielii

非洲黑蛋巢拉丁属名: Cyathus africanus

南极类芽孢杆菌拉丁属名: Paenibacillus antarcticus

大肠埃希氏杆菌拉丁属名: Escherichia coli

海洋伍斯菌拉丁属名: Woeseia  oceanium

淡紫褐链霉菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

七角井盐单胞菌拉丁属名: Halomonas ?qijiaojingensis

灵芝拉丁属名: Ganoderma lucidum

果生链核盘菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

德里腐霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

米曲霉拉丁属名: Aspergillus  oryzae
蛤弧菌探针法荧光定量PCR试剂盒 人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒英文名称:Human Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA Kit 特价供应

人干细胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒英文名称:Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA Kit 特价供应

人刚地弓形虫(T.gondii)ELISA试剂盒英文名称:Human Toxoplasma Gondii,T.gondii ELISA Kit特价供应

Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) peptide 髓样细胞-1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

Anti-phospho-AMPK beta 1(Ser182) 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-B-Raf (Ser444) 磷酸化B-Raf 规格 0.1ml

Tris- HCl-TWEEN 20缓冲液 100ml 0.5mol/L pH7.6

CD244 英文名称: CD244 0.2ml

Anti-phospho-IKB alpha (Ser32/36) 磷酸化IKB alpha(Ser32/36)Multi-class antibodies规格: 0.1ml

MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Beta) ELISA kit 人巨噬细胞炎性蛋白3βMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-GP65/SDFR1/NPTN 间质细胞衍化因子受体1Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的小鼠抗IgG 规格 0.1ml

AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit 人紧张素Ⅱ受体2 96T

RBBP6 英文名称: 视网膜母细胞瘤结合蛋白6 0.1ml

大鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒英文名称:Rat Estradiol,E2 ELISA Kit特价供应

FOXF1(Forkhead box protein F1) 叉头蛋白F1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

ALDH7A1 ALDH7A1 兔单抗 (FITC) Human

Rhesus antibody Rh phospho-Dnmt1(Tyr399) 磷酸化DNA甲基转移酶1 规格 0.1ml

BCIP/NBT显色试剂盒 50ml

ZNF471 英文名称: 锌指蛋白471 0.2ml

DKK2 英文名称: Wnt通路抑制因子2 0.2ml

CRR9 英文名称: 顺氯铂耐药相关蛋白9 0.2ml

Anti-EGF 表皮生长因子Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Anti-BGP/FITC 荧光素标记骨保护蛋白/骨钙素IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Anti-GLUT2/FITC 荧光素标记葡萄糖转运蛋白2IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh CK3 细胞角蛋白3 规格 0.1ml

CULLIN (Cdc53/CUL) 0.5mg

SOX13 英文名称: 胰岛细胞抗原12/核转录因子SOX13 0.2ml

 


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