- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR4198
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2024-09-19
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR4198 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
微细毛圆线虫探针法荧光定量PCR试剂盒规格 | Trichostrongylus tenuis | LZR4198 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
小单孢菌ApoC1 (Apolipoprotein C1) ELISA Kit用途: 代谢产物具有抗菌活性。
枯草芽孢杆菌ApoC2 (Apolipoprotein C2) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis
洪吉氏菌ApoC3 (Apolipoprotein C3) ELISA Kit拉丁属名: Hongiella sp.
硬毛栓孔菌ApoC4 (Apolipoprotein C4) ELISA Kit拉丁属名: Trametes trogii
毛头鬼伞ApoD (Apolipoprotein D) ELISA Kit 拉丁属名: Coprinus comatus
黑球漆斑菌ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit 用途: 分解纤维素
酿酒酵母ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
氧化节杆菌ApoH (Apolipoprotein H) ELISA Kit 拉丁属名: Arthrobacter oxydans
草菇ApoM (Apolipoprotein M) ELISA Kit 拉丁属名: Volvariella volvacea(Bull.:Fr.) Sing.
金黄色葡萄球菌ApoA5 (Apolipoprotein A5) ELISA Kit 拉丁属名: Staphylococcus aureus
球孢白僵菌ApoB100 (Apolipoprotein B100) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
枯草芽孢杆菌bFGF/FGF2 (Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus subtilis
平菇(侧5)ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
大肠埃希氏菌Aβ40 (Amyloid Beta 40) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia coli
变异纳西杆菌Aβ42 (Amyloid Beta 42) ELISA Kit拉丁属名: Naxibacter varians
微细毛圆线虫探针法荧光定量PCR试剂盒规格C* anaphylatoxin 英文名称: 过敏毒素C*/补体C* 0.1ml
Anti-CCR-3 细胞表面趋化因子受体3Multi-class antibodies规格: 0.1ml
小鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒英文名称:Mouse Cholecystokinin,CCK ELISA Kit特价促销
小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒英文名称:Mouse protein kinase B,PKB ELISA Kit特价供应
小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒 英文名称:Mouse Protein Phosphatase,PP ELISA Kit进口/分装
小鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒英文名称:Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit特价供应
小鼠免疫复合物(LDL-IC)ELISA试剂盒英文名称:Mouse LDL-IC ELISA Kit进口/原装
CCR7 英文名称: 细胞表面趋化因子受体7 0.1ml
Anti-Cathepsin D 组织蛋白酶DMulti-class antibodies规格: 0.1ml
MIP-1 Gamma 人巨噬细胞炎性蛋白-1γMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-Crk p38 /CrkII Crk p38Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Nm23/NME1/NME2 转移抑制基因 规格 0.1ml
Human transporter associated with antigen processing,TAP ELISA Kit 人抗原提呈相关转运蛋白/T细胞活化蛋白 96T
phospho-Tau protein(Ser422) 英文名称: 磷酸化微管相关蛋白 0.1ml
3-Apr 英文名称: 细胞凋亡相关蛋白3 0.1ml
Anti-CCR-2/5/FITC 荧光素标记CC趋化因子受体2/5IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
TE ELISA Kit 大鼠端粒酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Ack1/FITC 荧光素标记Ack1IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FGFR2/CD332 成纤维细胞生长因子受体2 规格 0.1ml
HNT-4(uman Neurotrophin 4) ELISA KIT 人神经营养因子4 96T
MIP4 英文名称: 巨噬细胞蛋白18 0.1ml
CPN10 英文名称: 叶绿体伴侣蛋白(苹果) 1ml
Anti-PARP (N-Terminus) 多腺苷二磷酸多聚酶(N端)Multi-class antibodies规格: 0.1ml
TR(Human targeted ribonuclease) ELISA Kit 人靶向核糖核酸酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Nm23-H1 抑制基因Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-10RB/CRFB4 白细胞介素-10受体β 规格 0.1ml
sE-selectin ELISA Kit 大鼠可溶性E选择素 96T
PAG1 英文名称: 跨膜接头蛋白PAG 0.1ml