客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

赭色栓菌Sheep MTHFR (Methylenetetrahydrofolate Reductase) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

枯草芽胞杆菌枯草亚种Sheep CEA (Carcinoembryonic Antigen)  ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis subsp. subtilis

田无链霉菌Sheep FE (Ferritin) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces tanashiensis

谷氨酸棒杆菌Sheep PKC (Protein Kinase C) ELISA Kit拉丁属名: Corynebacterium  glutamicum

头状秃马勃Sheep P-CK (Pan-Cytokeratin) ELISA Kit用途: 幼时可食，成熟药用

绿黄链霉菌Sheep ALK (Anapastic Lymphoma Kinase) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces viridoflavus

Aeromonas aquariorumSheep CCL4L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 4 Like Protein 1) ELISA Kit 拉丁属名: Aeromonas aquariorum

林生毛霉Sheep ANGPTL1 (Angiopoietin Like Protein 1) ELISA Kit拉丁属名: Mucor hiemalMucor silvaticus

美澳型核果褐腐病菌Sheep PHLDA2 (Pleckstrin Homology Like Domain Family A, Member 2) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

密歇根棍状杆菌标记亚种Sheep EMP (Erythrocyte Membrane Protein) ELISA Kit拉丁属名: Clavibacter michiganensis subsp. tessellarius

甜菜慢生根瘤菌Sheep INSR (Insulin Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Bradyrhizobium betae

热葡糖苷酶土芽孢杆菌Sheep IL-4 (Interleukin 4) ELISA Kit拉丁属名: Geobacillus  thermoglucosidasius

钦海特德沃斯氏菌Sheep PAIg (Platelet Associated Immunoglobulins) ELISA Kit拉丁属名: Devosia chinhatensis

枯草芽孢杆菌Sheep CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  subtilis

枯草芽胞杆菌枯草亚种Sheep α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit

拉丁属名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒供应商Anti-Zyxin/FITC 荧光素标记斑联蛋白IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2 规格 0.1ml

DCX(Doublecortin) 双皮质素抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

人纤维介素蛋白(fgl2)ELISA试剂盒 英文名称：Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit特价促销

人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒 英文名称：Human fibronection related antigen,FRA ELISA Kit特价促销

人纤维母细胞表面抗原(FSP)ELISA试剂盒英文名称：Human Fibroblast surface protein,FSP ELISA Kit进口/原装

人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA试剂盒 英文名称：Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit特价促销

CCL13 英文名称： 单核细胞趋化蛋白4 0.2ml

Anti-PLASTIN3/T Plastin 丝束蛋白T PlastinMulti-class antibodies规格： 0.2ml

human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA KIT 人类似RIKEN cDNA 2010109K09 基因Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Parkin protein 帕金蛋白Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh HOXA5 同源异型盒基因HOXA5蛋白 规格 0.1ml

IL-1 ELISA Kit 大鼠白介素1 96T

Polycystin 2 英文名称： 蛋白2 0.2ml

VWF 英文名称： 假性因子/性因子 0.1ml

Delta Opioid Receptor 英文名称： D型受体 0.1ml

anti-AQP1 水通道蛋白1Multi-class antibodies规格： 0.1ml

EID1 英文名称： 乙酰基转移酶EID1 0.2ml

CD7 Anti-CD7 0.1ml

Anti-VEGF-D/FIGF/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠内皮生长因子D型VEGFDIgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GPS1/CSN1(Ser474) 磷酸化G蛋白通路抑制蛋白1 规格 0.1ml

Cortactin 英文名称： 皮层肌动蛋白 0.2ml

Anti-GRIM19 干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Beta2-GP1 Ab IgA(Human Beta2-Glycoprotein 1 antibody IgA) ELISA Kit 人β2糖蛋白1IgAMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Integrin Alpha V + Beta1 整合素αVβ1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Lingo-1 Nogo受体反应蛋白 规格 0.1ml

HPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit 人状瘤病毒IgM 96T

RND2/Rho7 英文名称： Rho家族GTP酶2 0.2ml