客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

蔗糖伯克霍尔德氏菌Sheep PC (Plasma Anticoagulant Protein C) ELISA Kit拉丁属名: Burkholderia sacchari

醋化醋杆菌Sheep GPC3 (Glypican 3) ELISA Kit 拉丁属名: Acetobacter aceti

芽孢杆菌Sheep GSANA (Granulocyte Specific Anti-Nuclear Antibody) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

杂色曲霉Sheep ACA-IgG (Anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus versicolor

嗜盐长单胞菌 Sheep LAP (Leucine Aminopeptidase) ELISA Kit拉丁属名: Longimonas halophila

多主枝孢Sheep CK-18/KRT18 (Cytokeratin 18) ELISA Kit拉丁属名: Cladosporium herbarum (Persoon) Link et Fries

淡紫灰链霉菌Sheep TGM2 (Transglutaminase 2, Tissue) ELISA Kit用途: 代谢产物具有抗菌活性。

枯草芽孢杆菌Sheep PYY (Peptide YY) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

黄褐环锈伞Sheep TSLP (Thymic Stromal Lymphopoietin) ELISA Kit 拉丁属名: Pholiota spumosa

大肠埃希氏菌Sheep SGK2 (Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 2) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia coli

酿酒酵母Sheep PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

盐田盐单胞菌Sheep APT (Abnormal Prothrombin) ELISA Kit拉丁属名: Halomonas campisalis

大豆慢生根瘤菌Sheep GTF2B (General Transcription Factor IIB) ELISA Kit用途: 与大豆共生固氮

黄曲霉Sheep τPK1 (Tau-Protein Kinase) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus  flavus

大肠埃希菌Sheep ANG (Angiogenin) ELISA Kit拉丁属名: coli
螺旋体亚种探针法荧光定量PCR试剂盒说明书FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的丝/苏氨酸激酶抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

骨形态发生蛋白4 Anti-BMP4 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-E2F1 (Ser364) 磷酸化转录因子E2F-1 规格 0.1ml

X射线摄影暗匣5*7+增感屏 套

ZNF81 英文名称： 锌指蛋白81 0.2ml

phospho-DAP Kinase 2 (Ser318) 英文名称： 磷酸化凋亡相关蛋白激酶2 0.1ml

骨形态发生蛋白4 Anti-BMP4 0.1ml

CCKBR 英文名称： 促胃泌素受体 0.1ml

Anti-Phospho-EGFR(Thr669) 磷酸化表皮生长因子受体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

PARC/CCL18(Human pulmonary activation regulated chemokine) ELISA Kit 人肺部活化调节趋化因子Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉头蛋白4Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/FITC FITC标记的小鼠抗人IgM 规格 0.1ml

C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit 人CCAAT增强子结合蛋白α 96T

SPOCK2 英文名称： 蛋白聚糖2 0.2ml

Rhesus antibody Rh NPC1/Niemann Pick C1 尼曼匹克C1前体蛋白 规格 0.2ml

Col I (Human Collagen Type I ) ELISA Kit 人Ⅰ型胶原 96T

TPX2 英文名称： 微管相关同源蛋白TPX2 0.2ml

C6orf225 英文名称： 6号染色体开放阅读框225 0.2ml

Anti-phospho C-Met/HGFR(Tyr1365) 磷酸化原癌基因c-MetMulti-class antibodies规格： 0.1ml

猪E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒英文名称：Porcine E-Selectin ELISA Kit进口/原装

猪α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 英文名称：Porcine Interferon α,IFN-α ELISA Kit特价促销

Coronin 1a 英文名称： 肌动蛋白结合蛋白CORO1A 0.1ml

Anti-Phospho-NMDAR1 (Ser890) 磷酸化谷氨酸受体1Multi-class antibodies规格： 0.1ml

AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗人绒毛膜激素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-phospho-IKK beta (Tyr199) 磷酸化KB抑制蛋白激酶βMulti-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAGEA10 相关抗原10 规格 0.2ml

DPD(Human deoxypyridinoline) ELISA Kit 人脱氧酚/脱氧啉 96T

phospho-RAD9(Ser272) 英文名称： 磷酸化细胞周期检查控制蛋白质 0.1ml