客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

粟酒裂殖酵母Sheep MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁属名: Schizosaccharomyces  pombe

光硬皮马勃Sheep TAP (Transporter Associated with Antigen Processing) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

路普康湖冷杆菌Sheep CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit拉丁属名: Cryobacterium roopkundense

指状青霉Sheep AQP-4 (Aquaporin 4) ELISA Kit 拉丁属名: Penicillium digitatum

Paraconiothyrium hawaiiense Sheep GALR1 (Galanin Receptor 1) ELISA Kit 用途: 植物内生真菌

串珠镰孢Sheep ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit拉丁属名: Fusarium moniliforme

白地霉Sheep E2 (Estradiol) ELISA Kit拉丁属名: Geotrichum candidum

耐久肠球菌Sheep CAPA (Cytotoxin Associated Protein A) ELISA Kit拉丁属名: Enterococcus  durans

科恩根霉Sheep PRKAα1 (Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1) ELISA Kit 用途: 制葡萄糖用菌，产生葡萄糖苷酶

固氮菌Sheep ProGRP (Pro-Gastrin Releasing Peptide) ELISA Kit拉丁属名: Azotobacter sp.

枯草芽孢杆菌Sheep PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus  subtilis

酿酒酵母Sheep CYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit 用途: 发酵啤酒易清

人参土成对杆菌Sheep RB1 (Retinoblastoma Protein 1) ELISA Kit 拉丁属名: Dyadobacter sp.

节杆菌Sheep CTSL (Cathepsin L) ELISA Kit 拉丁属名: Arthrobacter sp.

枯草芽孢杆菌Sheep ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis
马生殖泰勒氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒 ATP7B 英文名称： 铜转运蛋白质β链 0.1ml

Anti- Alpha-ACTN4/FITC 荧光素标记抗α-辅肌动蛋白4IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

PPAR- Alpha(Mouse peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体αMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Cav-1/FITC 荧光素标记抗小凹蛋白IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh EID1 乙酰基转移酶EID1 规格 0.2ml

(CTX- I )ELISA Kit 大鼠Ⅰ型胶原C端肽 96T

MESP1 英文名称： 心发育中胚层相关蛋白1 0.2ml

CCDC67 英文名称： 卷曲螺旋结构域蛋白67 0.2ml

Anti-KLH 血蓝蛋白Multi-class antibodies规格： 0.1ml

ADV-IgM(Human Adenovirus IgM) ELISA Kit 人腺病毒IgMMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-KLK1 激肽释放酶1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh LANPL 富含亮氨酸样酸性核蛋白 规格 0.2ml

NKA ELISA Kit(Ret) 大鼠神经肽A 96T

P2RX5 英文名称： 三磷酸腺苷受体P2X5 0.2ml

Human IPO-38 ELISA Kit 人IPO-38蛋白 96T

Transglutaminase 2 英文名称： 谷酰胺转胺酶2 0.2ml

CLEC2/CLEC1B 英文名称： C型凝集素结构域家族1成员B 0.2ml

Anti-CYP21 胆固醇21-羟化酶Multi-class antibodies规格： 0.2ml

小鼠表面(HBsAb)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse hepatitis B virus surface antibody,HBsAb ELISA Kit进口/分装

小鼠表面抗原(HBsAg)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA Kit特价促销

小鼠核心(HBcAb)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse hepatitis B virus core antibody,HBcAb ELISA Kit进口/原装

Complement C3g fragment 英文名称： 补体C3g片段 0.1ml

Anti-Hemagglutinin (H2N2) 病毒血凝素(H2N2)Multi-class antibodies规格： 0.2ml

OX-B(Human Orexin B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新BMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MMAA/cblA 甲基尿症cblA 规格 0.2ml

PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit 人磷酸肌醇3激酶 96T

phospho-RGS19(Ser24) 英文名称： 磷酸化G蛋白信号转导调节因子19 0.1ml