- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR4139
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2024-09-19
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR4139 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
猪病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书 | Swine Papillomavirus | LZR4139 |
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
以下列是公司正在热销的产品:
纤细屈曲海生菌Sheep PDGFA (Platelet Derived Growth Factor Subunit A ) ELISA Kit 拉丁属名: Ancylomarina subtile
毛束霉Sheep COL10 (Collagen Type X) ELISA Kit 拉丁属名: Trichurus spiralis
屎肠球菌Sheep LTA (Lymphotoxin α)ELISA Kit拉丁属名: Enterococcus faecium
金针菇Sheep CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) ELISA Kit 拉丁属名: Collybia velutipes(Curt.:Fr.)Quel.
干酪乳杆菌Sheep MYD88 (Myeloid Differentiation Factor 88) ELISA Kit拉丁属名: Lactobacillus casei
枯斑拟盘多毛孢Sheep PKBG (Protein Kinase B Gamma) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
Lactococcus sp.Sheep AIF (Apoptosis Inducing Factor) ELISA Kit拉丁属名: Lactococcus sp.
匍匐曲霉Sheep CYTH1 (Cytohesin 1) ELISA Kit 拉丁属名: Aspergillus repens
草酸青霉Sheep BTA (Bladder Tumor Antigen) ELISA Kit拉丁属名: Penicillium oxalicum
PseudarthrobacterSheep C3a (Complement Component 3a) ELISA Kit拉丁属名: Pseudarthrobacter siccitolerans
粪纤维单胞菌Sheep AQP-3 (Aquaporin 3) ELISA Kit 拉丁属名: Cellulomonas fimi
污黑腐皮壳Sheep OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
平菇新宇711Sheep COL4 (Collagen Type IV) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
少根根霉Sheep tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit拉丁属名: Rhizopus arrhizus
米曲霉Sheep PDIA6 (Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus oryzae
猪病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书IFN-r 浓缩液 0.1ml 进口分装
Ubiquitously expressed transcript 英文名称: 广泛表达转录蛋白UXT 0.2ml
DPEP3 英文名称: 膜二肽酶3 0.2ml
Anti-Arfaptin 1 ADP核糖基化因子结合蛋白1Multi-class antibodies规格: 0.2ml
ERAB 英文名称: 内质网Aβ相关结合蛋白 0.1ml
组织蛋白酶E Anti-cath-E/CE 0.1ml
Anti-Urocortin 3/FITC 荧光素标记尿皮质素UCN3IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
CCDC54 英文名称: 卷曲螺旋结构域蛋白54 0.2ml
Anti-P16 基因p16Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Agtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit 人紧张素Ⅱ受体Ⅰa型Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-p53BP1/53BP1 p53结合蛋白1Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HSP70/HSPA1A 热休克蛋白-70 规格 0.1ml
hnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody) ELISA Kit 人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33 96T
PRAS40 英文名称: 蛋白激酶AKT底物1 0.2ml
人粒细胞特异性抗核(GS-ANA)ELISA试剂盒 英文名称:Human granulocyte specific antinuclear antibody,GS-ANA ELISA Kit特价供应
人内阿米巴抗原ELISA试剂盒英文名称:Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit特价促销
人链激酶(SK)ELISA试剂盒 英文名称:Human Streptokinase,SK ELISA Kit特价供应
S100B S100B蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5ml
Anti-Bcl-10/CLAP Bcl-10Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PHGDH 磷酸甘油酸脱氢酶 规格 0.2ml
IGF-1R 浓缩液 0.1ml 进口分装
COMMD8 英文名称: 铜代谢结构域蛋白8 0.2ml
Anti-PFK2/PFKFB3 6磷酸果糖激酶2Multi-class antibodies规格: 0.2ml
EBv IgM(Human epstein-barr virus IgM) ELISA Kit 人EB病毒IgMMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-KLF6 转染基因KLF6Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh large S protein 人乙毒pre S1/S2蛋白 规格 0.1ml
Glycoprotein VI(Human ) ELISA Kit 人糖蛋白VI 96T
PSGR 英文名称: 特异性G蛋白偶联受体/嗅觉受体51E2 0.1ml