客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

金顶侧耳Sheep PTPRO (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type O) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

炭疽芽孢杆菌Sheep SPJ (Surfactant Associated Protein J) ELISA Kit拉丁属名: anthracis

浅灰白链霉菌Sheep PROZ (Protein Z) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces griseoloalbus

蜡状芽孢杆菌Sheep DEFα5 (Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  cereus

淡青链霉菌Sheep ADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces glaucescens

大肠埃希氏菌Sheep TP (Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia coli

青蓝马杜拉放线菌Sheep S100A7 (S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit拉丁属名: Actinomadura coerulea

毛霉属Sheep TPP1 (Tripeptidyl Peptidase I) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

粘质沙雷氏菌Sheep TIMP-1 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit拉丁属名: marcescens

大肠埃希氏杆菌Sheep PDGF-AB (Platelet Derived Growth Factor AB) ELISA Kit 拉丁属名: Escherichia  coli

皱纹单胞菌Sheep HCCS (Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit 拉丁属名: Rugamonas rubra

基利恩帚枝霉Sheep COL14 (Collagen Type XIV) ELISA Kit拉丁属名: Sarocladium kiliense

酿酒酵母Sheep βTG/PBP/CXCL7/NAP2 (Thromboglobulin, Beta) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces Cerevisiae

Bacillus methylotrophicusSheep HO1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit 用途: 拮抗菌

矩圆黑盘孢Sheep GAL14 (Galectin 14 ) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用
布氏锥尾线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒英文名称：Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit进口/原装

大鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒英文名称：Rat lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 特价促销

大鼠淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒英文名称：Rat lymphotactin,Lptn/LTN ELISA Kit特价供应

大鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒英文名称：Rat lymphocyte factor ELISA Kit进口/原装

GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) 粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

MME CD10 / Neprilysin / MME 鼠单抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh Phospho-Cyclin B1(Ser126) 磷酸化周期素B1 规格 0.1ml

CCDC51 英文名称： 卷曲螺旋结构域蛋白51 0.2ml

Anti-FOXO3A 叉头蛋白O3AMulti-class antibodies规格： 0.2ml

PI3K 大鼠磷脂酰肌醇激酶Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-EPEC/E.coli 肠致病性大肠杆菌Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B 规格 0.2ml

PF-3(Human platelet factor 3) ELISA Kit 人血小板因子3 96T

SIM2 英文名称： 转录因子蛋白SIM2 0.2ml

ADCY1 英文名称： 腺苷酸环化酶1 0.2ml

Anti-CBFA1/RUNX2/FITC 荧光素标记成骨特异性转录因子IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

NT-4(Mouse Neurotrophin 4) ELISA kit 小鼠神经生长因子4Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-CD4/FITC 荧光素标记CD4蛋白IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh EB2/End binding protein 2 微管相关末端结合蛋白2 规格 0.2ml

Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit 小鼠CD19分子 96T

MYST1 英文名称： 组蛋白乙酰转移酶MOF 0.2ml

COMMD10 英文名称： 铜代谢结构域蛋白10 0.2ml

Anti-PGRN 颗粒蛋白前体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Cox V-IgM(Human Coxsackie virus IgM) ELISA Kit 人柯萨奇病毒IgMMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-KLK3 激肽释放酶3/舒素3Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh LAMP2/CD107B 溶酶体相关膜蛋白2 规格 0.1ml

ANG- II ELISA Kit 大鼠紧张素Ⅱ 96T

Perilipin A+B 英文名称： 脂滴包被蛋白A+B 0.2ml