客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

胶红酵母Sheep PG (Proteoglycan) ELISA Kit拉丁属名: Rhodotorula mucilaginosa

猜也蓬小单孢菌Sheep FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit 拉丁属名: Micromonospora chaiyaphumensis

木耳Sheep AFA (Anti-Filaggrin Antibody) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

丝核菌属Sheep MFI2 (Melanotransferrin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

虎皮香菇，漏斗香菇Sheep TFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

烟曲霉Sheep α-SMA (α-Smooth muscle actin) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus fumigatus

粉红孢囊游动放线菌Sheep NUP155 (Nucleoporin 155kDa) ELISA Kit拉丁属名: Actinoplanes rutilosporangius

香菇*Sheep MAN1A1 (Mannosidase Alpha Class 1A Member 1) ELISA Kit拉丁属名: Lentinus edodes (Berkeley) Singer

北京鸟氨酸微菌Sheep PDGFRα (Platelet Derived Growth Factor Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁属名: Ornithinimicrobium pekingense

科氏梭菌Sheep 5-NT (5-Nucleotidase) ELISA Kit拉丁属名: Clostridium  kluyveri

*明亮发光杆菌Sheep PICK1 (Protein Interacting With Protein Kinase C, Alpha 1)ELISA Kit拉丁属名: Photobacterium phosphoreum

异常汉逊酵母Sheep TP63 (Tumor Protein p63) ELISA Kit 拉丁属名: Hansenula  anomala

枯斑拟盘多毛孢Sheep α1BG (Alpha-1-B-Glycoprotein) ELISA Kit拉丁属名: Pestalotiopsis funerea

饮料  柠檬黄、日落黄Sheep GAP43 (Growth Associated Protein 43) ELISA Kit 拉丁属名: 饮料  柠檬黄、日落黄

假单胞菌属Sheep SYP (Synaptophysin) ELISA Kit拉丁属名: Pseudomonas  sp.
无齿类圆线虫探针法荧光定量PCR试剂盒说明书Anti-phospho-P53 (Ser9) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HSP10/CPN10 热休克蛋白10 规格 0.2ml

PCA-1/Yo(Human purkinje cell autoantibody) ELISA Kit 人抗浦肯野细胞/抗Yo 96T

uPA Receptor 英文名称： 尿激酶型纤溶酶原激活因子受体 0.1ml

CLASP1 英文名称： 细胞连接相关蛋白1 0.2ml

Anti-phospho-P53 (Ser9) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies规格： 0.1ml

EGFP 英文名称： 重组增强型绿色荧光蛋白 0.1ml

CCDC42 英文名称： 卷曲螺旋结构域蛋白42 0.2ml

Anti-P2Y4R/P2Ry4 P2Y4受体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

VD3(Human Vitamin D3) ELISA kit 人维生素D3Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-PLGF 胎盘生长因子Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh HES1 转录因子HES-1 规格 0.2ml

Fbg ELISA Kit 大鼠血纤蛋白原 96T

PRRSV 英文名称： 猪蓝耳病病毒 1ml

Anti-DcR3/TR6 诱捕受体3Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh NEK1 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK1 规格 0.2ml

Human islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit 人胰岛淀粉样多肽 96T

Transglutaminase 6 英文名称： 谷酰胺转胺酶6 0.2ml

CPNE9 英文名称： 伴侣蛋白9 0.2ml

Anti-DcR3/TR6 诱捕受体3Multi-class antibodies规格： 0.2ml

小鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Amylin ELISA Kit进口/原装

Collagen III 英文名称： Ⅲ型胶原蛋白/胶原蛋白3/3型胶原蛋白 0.1ml

Anti-HPV16-E6 人类状瘤病毒16Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Human fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 人趋化因子Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-CXCL5 上皮中性粒细胞活化肽78Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MMP-9 基质金属蛋白酶9 规格 0.1ml

MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A 96T

Phospho-RhoA(Ser188) 英文名称： 磷酸化RhoA蛋白 0.1ml