客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

枯斑拟盘多毛孢Sheep IFN-γ (Interferon Gamma) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

野油菜黄单胞菌Sheep IL-2 (Interleukin 2) ELISA Kit拉丁属名: Xanthomonas campestris

柯奈尼亚小单孢菌Sheep IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 拉丁属名: Micromonospora chokoriensis

黄杆菌Sheep CSTA (Cystatin A)  ELISA Kit 拉丁属名: Flavobacterium  urumqiense

膝形假单胞菌Sheep IL-12 (Interleukin 12) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

乳酸片球菌Sheep BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit拉丁属名: Pediococcus acidilactici

产酸酸杆菌Sheep IL-2R (Interleukin 2 Receptor) ELISA Kit 拉丁属名: Propionibacterium acidipropionici

 Trichosporon oleaginosusSheep OPG (Osteoprotegerin) ELISA Kit 拉丁属名:  Trichosporon oleaginosus

白浅灰链霉菌Sheep IL-6 (Interleukin 6) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces albogriseolus

水嗜冷杆菌Sheep IL-18 (Interleukin 18) ELISA Kit拉丁属名: Psychrobacter aquaticus

苏云金芽胞杆菌Sheep CKLFSF5 (Chemokine Like Factor Superfamily 5) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  thuringiensis

大肠埃希氏菌Sheep TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia  coli

肿痂链霉菌Sheep AP 13 (Apelin 13) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces turgidiscabies

鲍氏志贺氏菌Sheep DCX (Doublecortin) ELISA Kit 拉丁属名: Shigella boydii

香菇Sheep CK-HMW (Cytokeratin High Molecular Weight) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用
链球菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明书Rhesus antibody Rh phospho-ATG16A(Ser287) 磷酸化自噬相关蛋白16A 规格 0.1ml

山羊SP(AP)试剂盒 140片 进口原料

UAP56 英文名称： ATP-依赖的RNA解旋酶p47 0.1ml

DNA Ligase 1 英文名称： DNA连接酶1 0.1ml

Anti-phospho-Androgen Receptor (Ser580) 磷酸化雄激素受体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

EDIL3 英文名称： 表皮生长因子样重复折叠1结构域蛋白3 0.2ml

嗜中性粒细胞抗原CD177 Anti-CD177/NB1 0.1ml

CCDC28A 英文名称： 卷曲螺旋结构域蛋白28A 0.2ml

Anti-MKK3 原活化蛋白激酶MKK3Multi-class antibodies规格： 0.2ml

CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit 人心肌肌凝蛋白轻链1Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-phospho-p53BP1(Ser25/29) 磷酸化p53结合蛋白1Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HSJ2/DNAJB6 热休克蛋白J2 规格 0.2ml

C*(Mouse Complement fragment *)ELISA Kit 小鼠补体片断* 96T

PNCK 英文名称： 钙/钙调素依赖蛋白激酶1β/CaMKIβ 0.2ml

人脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒英文名称：Human deoxypyridinoline，DPD ELISA Kit特价供应

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒英文名称：Human deoxyribonuclease Ⅰ,DNase-Ⅰ ELISA Kit特价供应

人脱氧胶原吡啶交联(DPD)ELISA试剂盒英文名称：Human Deoxypyridinoline crosslinks,DPD ELISA Kit特价供应

人脱氧尿三磷酸(DUTP)ELISA试剂盒 英文名称：Human deoxyuridinetriphate,DUTP ELISA Kit进口/原装

PAX9(Paired box gene 9) 配对盒基因9抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-ATG7 自噬相关蛋白7Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-AP2M1 (Thr156) 磷酸化接头相关蛋白复合体AP-2μ链1 规格 0.1ml

CO4A2 英文名称： 胶原蛋白4a2亚基 0.2ml

Anti-LIF 抑制因子Multi-class antibodies规格： 0.1ml

CR(Human Calretinin) ELISA Kit 人钙结合蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163) 磷酸化髓样细胞-1Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh JAM1 连接粘附分子1 规格 0.1ml

BTC ELISA Kit 大鼠β细胞素 96T

PPHLN1 英文名称： 脉周蛋白1(抗原蛋白Ga50) 0.2ml