客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

地星FGFR1 (Fibroblast Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit 用途: 药用

盐沼盐杆菌AMY1 (Amylase Alpha 1, Salivary) ELISA Kit拉丁属名: Halobacterium salinarum

根杆菌属MIA1 (Melanoma Inhibitory Activity Protein 1) ELISA Kit拉丁属名: Rhizobacter  fulvus

樟疫霉*sIgA (Secretory Immunoglobulin A) ELISA Kit 拉丁属名: Phytophthora cinnamomi

酿酒酵母CR (Calretinin) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

pIB139PF4V1 (Platelet Factor 4 Variant 1) ELISA Kit 拉丁属名: 宿主：DH5α，BL21

龟裂链霉菌AST (Aspartate Aminotransferase) ELISA Kit用途: 益生菌

粗糙拟迷孔菌F13A1 (Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

大囊接霉MF/MPF (Maturation Promoting Factor) ELISA Kit拉丁属名: Zygorhynchus macrocarpus

草菇MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

大豆慢生根瘤菌NUP37 (Nucleoporin 37kDa) ELISA Kit用途: 与大豆共生固氮,培养基pH4.2生长

鸭疫里氏杆菌MFG-E8 (Milk Fat Globule EGF Factor 8) ELISA Kit拉丁属名: anatipestifer

链状双歧杆菌F-TESTO (Free Testoterone) ELISA Kit拉丁属名: Bifidobacterium catenulatum

略紫链霉菌MSMβ (Microseminoprotein Beta) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces violarus

地衣生考克娃酵母TPP1 (Tripeptidyl Peptidase I) ELISA Kit拉丁属名: Kockovaella lichenicola
犬链球菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书ATXN3L 英文名称： 小脑脊髓蛋白3 0.2ml

Anti-Cdc6/FITC 荧光素标记细胞分裂周期蛋白6IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

iFABP ELISA Kit 大鼠肠脂肪酸结合蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Acinus(phospho S1180)/FITC 荧光素标记腺泡磷酸化AcinusIgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FGFR3/CD333 成纤维细胞生长因子受体3 规格 0.1ml

omentin(Mouse omentin) ELISA Kit 小鼠网膜素 96T

MITF 英文名称： MITF相关转录因子 0.2ml

CCDC146 英文名称： 卷曲螺旋结构域蛋白146 0.2ml

Anti-KIF17 驱动蛋白家族KIF17Multi-class antibodies规格： 0.2ml

HO-2(Heme oxygenase 2) 血红素氧合酶-2抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-AATF 拮抗凋亡转录因子Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Thr239) 磷酸化原癌基因c-Jun 规格 0.1ml

兔抗鸡IgG血清 0.5ml 国产

PAG608 英文名称： 野生型P53诱导基因1 0.1ml

CHST5 英文名称： 碳水化合物磺基转移酶5 0.1ml

Anti-BACE/ASP2 β分泌酶Multi-class antibodies规格： 0.2ml

EMC1 英文名称： 腺样癌特异性相关抗原EMC1 0.1ml

锌指脂蛋白-1b Anti-ZNF268 - middle 0.2ml

Anti-TTF-2/FITC 荧光素标记甲状腺转录因子-2IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α 规格 0.1ml

Trk C 神经生长因子受体的一种(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

CNOT6 英文名称： 细胞表面趋化因子受体4相关蛋白6 0.2ml

Anti-PEG3 PEG3蛋白Multi-class antibodies规格： 0.2ml

HCV-IgM(Human Hepatitis C virus IgM) ELISA Kit 人IgMMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Kv1.3/PCN3 离子通道蛋白Kv1.3Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh laminin 层粘连蛋白 规格 0.1ml

BMPR-1A ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白受体1A 96T

Pumilio 1 英文名称： PUM1蛋白 0.2ml