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志贺氏菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR4083
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-19
  • 更新日期: 2024-11-08
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR4083
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

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志贺氏菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

Shigella spp.

LZR4083

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

中度嗜热双突柄菌CEP110 (Centrosomal Protein 110kDa) ELISA Kit 拉丁属名: Amphiplicatus metriothermophilus

刺葡萄孢霉属GDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

管毛壳NCAD (Neural Cadherin) ELISA Kit拉丁属名: Chaetomium cuniculorum

非洲黑蛋巢DLK-1 (Delta Like 1 Homolog) ELISA Kit拉丁属名: Cyathus africanus

紫荆生叶点霉菌SCF (Stem Cell Factor) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

香菇TR (Thrombin Receptor) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

子午线假单胞菌CALU (Calumenin) ELISA Kit拉丁属名: Pseudomonas meridiana

 口腔支原体DPP4 (Dipeptidyl Peptidase IV) ELISA Kit拉丁属名: orale

长野解支链淀粉芽孢杆菌SOD1 (Superoxide Dismutase 1, Soluble) ELISA Kit拉丁属名: Pullulanibacillus naganoensis

扶桑本森顿酵母α1BG (Alpha-1-B-Glycoprotein) ELISA Kit拉丁属名: Bensingtonia yamatoana

酿酒酵母UPP2 (Uridine Phosphorylase 2) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae

链霉菌FETUA (Fetuin A) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces  sp.

温特曲霉原变种PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus wentii var. wentii

锗栓孔菌TAP (Transporter Associated with Antigen Processing) ELISA Kit拉丁属名: Trametes ochracea

香菇NFYC (Nuclear Transcription Factor Y Gamma) ELISA Kit  注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
志贺氏菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒说明书Rhesus antibody Rh phospho-ATXN1(Thr236) 磷酸化失调症蛋白1 规格 0.1ml

山羊抗兔 IgG(H+L)/Biotin 0.1ml 美国Jackson公司分装

VEGF-A 英文名称: 内皮生长因子A 0.1ml

DNA polymerase delta 英文名称: DNA聚合酶γ 0.2ml

Anti-APOD 载脂蛋白DMulti-class antibodies规格: 0.2ml

ERK4 英文名称: 细胞外信号调节激酶4 0.1ml

Smad 2/3 Anti-Smad2/3 0.1ml

CBLN1 英文名称: 小脑肽1 0.2ml

Anti-GADD45 生长抑制DNA损伤基因45Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Anti-Brucella/Biotin 生物素标记抗布鲁氏菌IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Anti-GRM4/mGluR4/FITC 荧光素标记促代谢型谷氨酸受体4IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ChRM3/Acetylcholine receptor(M3) 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3 规格 0.1ml

Angiotensin II receptor(Ang II ) 紧张素Ⅱ受体(抗原) 0.5mg

rat IgA 英文名称: 大鼠血清型IgA 0.2ml

人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒 英文名称:Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit 特价供应

人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA试剂盒 英文名称:Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA Kit特价促销

人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA试剂盒 英文名称:Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA Kit进口/原装

人免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)ELISA试剂盒英文名称:Human Fc region of immunoglobulin G,Fcγ ELISA Kit 进口/分装

人免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒英文名称:Human Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 进口/原装

PSAP/PAP peptide 酸性磷酸酶抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

Anti-Bad 相关死亡促进因子BadMulti-class antibodies规格: 0.1ml

CLN5 英文名称: 神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN5 0.2ml

Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 磷酸化P63抑制基因Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Human Leishimaria antibody ELISA Kit 人利什曼原虫Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-KLF13/RFLAT-1 肠道内富含的Kruppel样因子13Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh LAPTM4A 溶酶体相关膜蛋白4α 规格 0.2ml

P-CK(Pig pan-cytokeratin) ELISA Kit 猪广谱细胞角蛋白 96T

PRR7 英文名称: 突触富含脯酸膜蛋白7 0.2ml

 


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