PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
以下列是公司正在热销的产品：

产阿拉伯糖汉逊酵母Pro-MMP-13 (Pro-Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit拉丁属名: Hansenula arabitolgenes

酿酒酵母CACYBP (Calcyclin Binding Protein) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

大肠埃希氏菌TYR (Tyrosinase) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia  coli

戴尔根霉α1-AT (Alpha 1-Antitrypsin) ELISA Kit拉丁属名: Rhizopus  delemar

豇豆慢生根瘤菌CENPB (Centromere Protein B) ELISA Kit用途: 与花生共生固氮

复轮生小克银汉霉HSP-60/HSPD1 (Heat Shock Protein 60) ELISA Kit拉丁属名: Cunninghamella multiverticillata

马链球菌马亚种DCN (Decorin) ELISA Kit拉丁属名: egui subsp.equi

大肠埃希氏菌MYH10 (Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia coli

变幻青霉MVP (Major Vault Protein) ELISA Kit拉丁属名: Penicillium variabile

葡萄酒 总二氧化硫 拉丁属名：葡萄酒 总二氧化硫 规格：350mL 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

费希尔曲霉 拉丁属名：Aspergillus fischeri 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

顶生腐霉 拉丁属名：Globisporangium acrogynum 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

薄层菌属 拉丁属名：Hymenobacter antarcticus 规格：冻干物 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 模式菌株:非模式菌株 主要用途:分类；研究；教学 特征特性:革兰氏阴性菌，细胞呈球形，无运动性，严格好氧，产红色素，菌落形态为圆形，光滑，凸起，生长温度为10到32度。 

冲击地土地杆菌 拉丁属名：Pedobacter alluvionis 规格：冻干物 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 模式菌株:非模式菌株 主要用途:分类；研究；教学 特征特性:该菌株的形态呈杆状，1.9－2.5 m × 0.63－０.83 m，革兰氏反应阴性，不形成芽孢，不运动，以二分裂方式增殖。菌落形态为圆形，凸起，湿润。生长温度为9-32℃，最适生长温度为25℃，最适生长pH为5.70-8.16。 

条斑病菌* 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 拉丁属名：Xanthomonas 种名加词：oryzae pv. oryzicola

暗黄紫链霉菌 拉丁属名：Streptomyces fulvoviolaceus 规格：冻干物 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 模式菌株:非模式菌株 主要用途:研究；教学 特征特性:菌丝纤细、无隔、多核、分枝，革兰氏阳性，菌丝体发达，分化成基内菌丝和气生菌丝，后者成熟后发育成孢子丝，可裂生大量分生孢子进行散播、繁殖。菌落小而致密、干而不透明，幼时表面光滑、边缘整齐、颜色单调、不易挑起，继而发展成绒毛状、表面起粉、色泽丰富，正反面颜色往往不同。有较强的淀粉和蛋白质水解能力(尤其是角蛋白)。 

禽网状内皮组织增生病病毒 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

布氏假单胞菌 拉丁属名：Pseudomonas brenneri 用途：研究；分析检测；AOC分析。 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

羊蹄甲长蠕孢 用途：研究 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 属名：Helminthosporium 种名加词：bauhiniae 模式菌株：非模式菌株 主要用途：a:1:{i:0;s:4:研究;} 特征特性：自然基质上菌丝埋生，假子座大多埋生，暗褐色至黑褐色。分生孢子梗从子座表面单生或丛生，直或略弯曲，有隔，隔间距17－36μm，不分枝，近圆柱形，褐色至黑褐色，至顶端色泽渐淡，外壁光滑，高180-650μm，基部宽12－20μm，顶端宽8－10μm，顶端和上部1－4隔膜下侧细胞壁上形成产孢孔。分生孢子通过小孔以内壁芽生孔生(eb-tret)方式产生，分生孢子有喙倒棍棒形，直或弯，半透明至浅褐色，至顶端色泽渐淡，具9－15假隔膜，外壁光滑，长 63－85μm，最宽处宽13－21μm，顶端宽4－5μm，基部具有黑色，明显突出，平截的，厚度2－4μm。 具体用途：研究

考克氏菌属 拉丁属名：Kocuria sp. 用途：研究； 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究 具体用途： 特征特性：菌落圆形，橙黄色，表面光滑、湿润、边缘整齐。 

漆斑菌 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 属名：Myrothecium 种名加词：cinctum

葡萄穗霉 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 拉丁属名：Stachybotrys 种名加词：chartarum (Ehrenb.) S. Hughes 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究；教学 具体用途： 特征特性：分生孢子梗未成熟时无色，成熟后褐色，有分隔1-4个，当*个分生孢子梗成熟后（变褐色），在分生孢子梗最下面的分隔处再产生分生孢子梗；分生孢子梗上部褐色（从基部*个分隔往上），其上好似有凸起的颗粒物，下部近无色（从基部*个分隔往下）。分生孢子梗31-72×3.7-5.5µm，平均55.2×4.4µm。分生孢子梗比产生分生孢子梗的菌丝更粗。分生孢子梗顶端膨大体：无色到淡褐色，倒梨形，侧面观为4个，正面观为8-9个，大小6.2-12.5×4.7-6.2µm，平均9.7×5

肿痂链霉菌 拉丁属名：Streptomyces turgidiscabies 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

肠杆菌属MCP-2/CCL8 (Monocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

枯草芽孢杆菌BFP (Brain Finger Protein) ELISA Kit  拉丁属名: Bacillus  subtilis

钩状木霉AFGF/FGF1 (Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

假单胞菌MRP1 (Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit用途: 微生物肥料

*樱桃链格孢BMP-10 (Bone Morphogenetic Protein 10) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

红硬囊果青霉PAI2 (Plasminogen Activator Inhibitor 2 )ELISA Kit 拉丁属名: Penicillium rubidurum
扇革蜱通用探针法荧光定量PCR试剂盒供应商CLIC2 英文名称： 氯离子通道蛋白2 0.1ml

Anti-CYP1A1 细胞色素P450 1A1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

F III (Human coagulation factor III 0 ELISA Kit 人凝血因子ⅢMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-PH-4/P4H-TM 脯氨酸水解酶4Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh HDAC11 组蛋白去乙酰化酶11 规格 0.1ml

BetaGAL(Mouse Beta-galactosidase) ELISA Kit 小鼠β半乳糖苷酶 96T

Thrombin receptor 英文名称： 蛋白酶激活受体-1 0.1ml

Carboxypeptidase A2 英文名称： 羧肽酶A2 0.1ml

Anti-Nephrin 去氧肾上腺素Multi-class antibodies规格： 0.1ml

PPI(Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase) ELISA Kit 人肽基脯氨酰顺反异构酶Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-nectin 2/CD112 细胞黏附分子CD112Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-26/AK155 白介素26 规格 0.2ml

MDC/CCL22 ELISA Kit 大鼠巨噬细胞来源的趋化因子 96T

phospho-P53(Ser46) 英文名称： 磷酸化抑制基因P53 0.1ml

豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 英文名称：guinea pig transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit 特价促销

phospho-Tau protein (pThr489) peptide 磷酸化微管相关蛋白Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-BrdU 溴脱氧尿苷Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Pectinesterase 果胶酶 规格 1ml

CD43 浓缩液 0.1ml 进口分装

TSHR (CT) 英文名称： 促甲状腺素受体(C端) 0.1ml

Calpain 2 英文名称： 钙激活的中性蛋白酶2 0.1ml

CK3 英文名称： 细胞角蛋白3 0.1ml

Anti-phospho-CaMK2 alpha (Thr286) 磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2αMulti-class antibodies规格： 0.1ml

sIL-2R 人可溶性白介素-2受体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-c-Fos (Thr325) 磷酸化c-fosMulti-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Nurr1 核受体相关因子-1 规格 0.1ml

Citrate buffer(1M pH6.0) 抗原热修复试剂(100×浓缩液) 60ml

Phospho-TrkA(Tyr496) +TrkB(Tyr516) 英文名称： 磷酸化酪酸激酶A 0.1ml