PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

反卷毛壳α2-PI (α2-Plasmin Inhibitor) ELISA Kit拉丁属名: Chaetomium convolutum

云芝栓孔菌DLAT (Dihydrolipoyl Transacetylase) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

黑木耳云章氏酵母G6PD (Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase) ELISA Kit 拉丁属名: Yunzhangia auriculariae

芽胞杆菌属FGFR2 (Fibroblast Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus sp.

鞘氨杆菌CRT (Calreticulin) ELISA Kit 拉丁属名: Sphingobacterium  sp.

瘤突曲霉CTR (Calcitonin Receptor) ELISA Kit 拉丁属名: Aspergillus tuberculatus

卷枝毛霉Lptn/XCL1 (Lymphotactin) ELISA Kit拉丁属名: Mucor  circinelloides

粪肠球菌PON1 (Paraoxonase 1) ELISA Kit拉丁属名: faecalis

褐囊蜜环菌CASP14 (Caspase 14) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

苏云金芽孢杆菌景洪亚种H-Cadherin (Cadherin, Heart) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

蛹虫草（北冬虫夏草，北虫草）KAF (Keratinocyte Autocrine Factor) ELISA Kit拉丁属名: Cordyceps  militaris

帕氏食氢产水菌 拉丁属名：Hydrogenophaga palleronii 规格：冻干物 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 模式菌株:非模式菌株 主要用途:分类；研究；教学 特征特性:直杆状，端圆，通常为0.5μm× 1.0～3.0 μm，细胞内不含聚β-羟基丁酸盐，不形成内生孢子，革兰氏阴性。不运动，无滑动或泳动。严格好氧。在固体培养基上生长，产生典型的色素(黄色或橙色)，但有些菌株不产色素。菌落半透明(偶尔为不透明)，圆形(直径1～2 nm)，隆起或微隆起，光滑且有光泽，全缘。

金霉素链霉菌 用途：Produces aureomycin (U.S. Pat. 2,482,055), chlortetracycline, tetracycline (U.S. Pat. 3,053,740). 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 属名：Streptomyces 种名加词：aureofaciens

戈卢别夫氏酵母 拉丁属名：Golubevia pallescens 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

绛红小单孢菌 拉丁属名：Micromonospora purpurea 用途：分类；研究； ；分类学研究。产庆大霉素。 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

彭氏变形杆菌 拉丁属名：Proteus penneri 规格：冻干粉 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

光黑腹菌 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 拉丁属名：Rhizopogon 种名加词：piceus Berk. & M.A. Curtis

大孢硬皮马勃 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 拉丁属名：Scleroderma 种名加词：bovista Fr.

黄孢紫红菇 用途：属外生菌根菌 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 拉丁属名：Russula 种名加词：turci Bres. 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究；教学 具体用途：属外生菌根菌 特征特性：子实体较小，菌盖直径2.5-7cm，扁半球形或扁平至近平展，中部稍下凹，紫红色之淡紫色，中部色较深，后期变淡，有时便黄色或浅黄色，盖表形成微颗粒或小龟裂，边缘平滑或稍有条纹。菌肉白色。菌褶浅黄白色，直生，厚而脆，不分叉，有横脉。菌柄长3-5cm，粗0.8-1.5cm，圆柱形或棒状，白色，内实变松软至空心。孢子无色，有小疣，棱脊相连近网状，近球形，（7-9）umx（6-7）um。褶侧囊体紧梭形或具短尖，（45-65）umx（7-10）um。夏秋季于松林中地上群生，分布于云南等地。可食用。属树木外生菌根。

热带根瘤菌 拉丁属名：Rhizobium tropici 用途：模式菌株 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

弯孢菌 用途：研究 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 属名：Curvularia 种名加词：sp.

三角孢小囊菌 拉丁属名：Microascus trigonosporus 规格：斜面培养物 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

短芽孢杆菌属 拉丁属名：Brevibacillus sp. 用途：研究； 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用 模式菌株：非模式菌株 主要用途：研究 具体用途： 特征特性：菌落直径2.0mm，为圆形，扁平，边缘整齐，表面有光泽，淡黄色，不透明，有黑色菌芯，在37℃生长    

狭窄刺革菌 拉丁属名：Hymenochaete attenuata 注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

亚褐钹孔菌NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

三线镰孢IL-2Rβ (Interleukin 2 Receptor Beta) ELISA Kit拉丁属名: Fusarium tricinctum

阿姆斯特丹曲霉ERK3 (Extracellular Signal Regulated Kinase 3) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus amsodami

RP4质粒CFP (Complement Factor P) ELISA Kit拉丁属名: RP4
绵羊病毒2型探针法荧光定量PCR试剂盒供应商DHRS7B 英文名称： 短链脱氢酶/还原酶家族7B 0.2ml

Anti-Arfaptin 2 ADP核糖基化因子结合蛋白2Multi-class antibodies规格： 0.2ml

CD209 英文名称： 细胞间粘附分子非整合素蛋白3 0.1ml

醛缩酶A Anti-ALDA 0.1ml

Anti-MMP-2/RBITC 红色罗丹明标记基质金属蛋白酶-2IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FAK(Tyr576/577) 磷酸化粘着斑激酶 规格 0.1ml

Cx32(Connexin-32) 间隙连接蛋白32抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

C9orf72 英文名称： 9号染色体开放阅读框72 0.2ml

Anti-Integrin alpha 6/CD49f 整合素α6Multi-class antibodies规格： 0.2ml

PGF2 Alpha(Human Prostaglandin F2 Alpha) ELISA Kit 人素F2αMulti-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-MARCKS (Ser152/156) 磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物MarcksMulti-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh KGF/FGF7 纤维母细胞生长因子7 规格 0.1ml

Cox V-IgM(Human Coxsackie virus IgM) ELISA Kit 人柯萨奇病毒IgM 96T

PNMT 英文名称： 胺甲基转移酶 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CDK6 (Tyr13) 磷酸化周期素依赖性激酶6 规格 0.1ml

人IgG 干粉 10mg/50mg/100mg 国产

WISP3 英文名称： Wnt1信号通路蛋白3 0.2ml

DOCK4 英文名称： 细胞质分裂付出蛋白4 0.2ml

Anti-Actinin alpha 4 α-辅肌动蛋白4Multi-class antibodies规格： 0.2ml

EV71 polyprotein 3D 英文名称： 肠道病毒71型/病毒 0.2ml

生精细胞凋亡相关基因4 Anti-TSARG4 0.2ml

CGNL1 英文名称： 结蛋白样蛋白CGNL1 0.1ml

Anti-HCN4 环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型4Multi-class antibodies规格： 0.2ml

PCX(Human Podocalyxin) ELISA Kit 人足细胞标记蛋白/足盂蛋白Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-HER2 receptor HER2受体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Midkine 中期因子/肝素结合生长因子 规格 0.1ml

CDK-4(Human Cyclin-dependent kinase 4) ELISA Kit 人周期素依赖性激酶4 96T

RNF31 英文名称： 环指蛋白31 0.2ml