PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

茶树菇P-Cadherin (Cadherin, Placental) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

绿木霉BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit拉丁属名: Trichoderma virens

托姆青霉NA/NE (Noradrenaline/Norepinephrine) ELISA Kit拉丁属名: Penicillium thomii

松口蘑NUP50 (Nucleoporin 50kDa) ELISA Kit拉丁属名: Tricholoma matsutake

蒙氏假单胞菌FGL2 (Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit拉丁属名: Pseudomonas monteilii

乳酸链球菌α-SMA (α-Smooth muscle actin) ELISA Kit用途: 用于制酸奶

德氏乳杆菌IGF-1 (Insulin Like Growth Factor 1) ELISA Kit 拉丁属名: Lactobacillus delbrueckii

峡湾嗜冷杆菌MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit 拉丁属名: Psychrobacter  fjordensis

茄镰孢ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit拉丁属名: Fusarium solani

酒红链霉菌FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) ELISA Kit拉丁属名: Streptomyces vinaceus Jones

云芝栓孔菌（变色栓菌）IL-2 (Interleukin 2) ELISA Kit拉丁属名: Trametes versicolor

灵芝属ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁属名: Ganoderma  sp.

铜绿假单胞菌PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit 拉丁属名: Pseudomonas  Aeruginosa

泰国葡糖杆菌REG3γ (Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit 拉丁属名: Gluconobacter thailandicus

中慢生华癸根瘤菌MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit用途: 与达乌里黄芪、沙打旺共生固氮
无绿藻通用探针法荧光定量PCR试剂盒 Anti-Collagen X Ⅹ型胶原Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Nogo R 轴索过度生长抑制因子受体/Nogo受体 规格 0.1ml

Human Alpha Lactalbumin, Alpha-La ELISA Kit 人α乳清蛋白 96T

TSHB(2T11) 英文名称： 促甲状腺素单克隆 0.1ml

CD93 英文名称： CD93 0.2ml

Anti-Collagen X Ⅹ型胶原Multi-class antibodies规格： 0.1ml

小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒英文名称：Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit特价供应

Calponin 1 英文名称： 钙调节蛋白-1 0.1ml

Anti-CCL24/Eotaxin-2 嗜酸粒细胞趋化蛋白24Multi-class antibodies规格： 0.2ml

IL-2 人白介素-2Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-c-Fos (Thr232) 磷酸化c-fosMulti-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NUSAP1 核仁和纺锤体相关蛋白1 规格 0.2ml

Citrate buffer powders(0.01M pH6.0) packages 柠檬酸盐缓冲液(抗原热修复试剂)(0.01M pH6.0) 1000ml

Phospho-TrkA (Tyr785)+TrkB (Tyr816) 英文名称： 磷酸化酪酸激酶A 0.1ml

小鼠α2纤溶酶抑制物(α2-PI)ELISA试剂盒英文名称：Mouse α2-plasmin inhititor,α2-PI ELISA Kit 进口/分装

小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒英文名称：Mouse α-L-iduronidase,IDUA ELISA Kit 特价促销

Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-CTNNAL1 粘附分子相关蛋白a1Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PDCD4 凋亡相关蛋白4 规格 0.2ml

CSF1R Kit Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 ELISA配对 ELISA

TSARG2 英文名称： 形成相关凋亡蛋白2 0.2ml

CIAPIN1 英文名称： 细胞因子诱导凋亡抑制因子1 0.2ml

Anti-CEA 癌胚抗原Multi-class antibodies规格： 0.1ml

HSP-27(Heat Shock Protein 27) 热休克蛋白-27(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-CD17 CD17Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAP1/Acid Phosphatase 酸性磷酸酶 规格 0.2ml

CPB1 Kit Human 人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配对 ELISA

Phospho-Tie2 (Tyr992) 英文名称： 磷酸化生成素受体2 0.1ml