PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

北方栖低境菌CCL3L1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1) ELISA Kit拉丁属名: Subtercola boreus

维罗纳假单胞菌PKB (Protein Kinase B) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

枯草芽孢杆菌SIGLEC10 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 10) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  subtilis

韩国游动微菌VEGF-B (Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit 拉丁属名: Planomicrobium koreense

茶藨子葡萄座腔菌PIAS1 (Protein Inhibitor of Activated STAT 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

美味丝葚霉SAA (Serum Amyloid A) ELISA Kit用途: 发酵法 蛋白质（人造肉）

马腺疫链球菌兽疫亚种CKLFSF4 (Chemokine Like Factor Superfamily 4) ELISA Kit拉丁属名: equi       subsp.zooepidemicus

粪锈伞XCR1 (XC-Chemokine Receptor 1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

不动杆菌属NUP37 (Nucleoporin 37kDa) ELISA Kit拉丁属名: Acinetobacter sp.

Aurantimonas altamirensis PGA (Pepsinogen A ) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

红色长孢链霉菌GIP (Glucose Dependent Insulin Releasing Polypeptide) ELISA Kit用途: 分类 研究

大鸡03ER (Estradiol Receptor) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

粗糙脉孢菌CRYαB (Crystallin Alpha B)  ELISA Kit 拉丁属名: Neurospora crassa

科氏葡萄球菌科氏亚种TMPRSS2 (Transmembrane Protease, Serine 2) ELISA Kit 用途: Taxonomy/description (615, 1300, 1334). Murein: A11.2 (615). Teichoic acid: glycerol (615).

蜡状芽孢杆菌CALU (Calumenin) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  cereus
猪圆环病毒2型探针法荧光定量PCR试剂盒规格TRPC3 英文名称： 色酸相关蛋白3 0.1ml

CHM 英文名称： 遗传性脉络膜缺乏症相关蛋白 0.1ml

Anti-CX3CL1 CX3CL1Multi-class antibodies规格： 0.1ml

小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Ubiquitin,Ub ELISA Kit 进口/原装

小鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit进口/原装

小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit特价供应

小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒英文名称：Mouse secretory immunoglobulin A,sIgA ELISA Kit进口/分装

Calcineurin A 英文名称： 钙调磷酸酶 0.1ml

Anti-CCL26/Eotaxin 3 嗜酸粒细胞趋化蛋白3Multi-class antibodies规格： 0.2ml

sICAM-1 human 人可溶性细胞间粘附分子-1Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Collagen IV 抗IV型胶原Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh NOL8 核仁蛋白8 规格 0.2ml

Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 人的血清白蛋白残留检测 96T

phospho-Tau protein(Ser262) 英文名称： 磷酸化微管相关蛋白 0.1ml

大鼠β-防御素(β-DF)ELISA试剂盒英文名称：Rat β-Defensins,β-DF ELISA Kit特价供应

大鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit特价供应

大鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒英文名称：Rat Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit特价供应

F1 operon positive regulatory protein(NT) 耶尔森氏菌F1荚膜蛋白(N端多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

抗丁酰胆碱脂酶单克隆 Anti-BCHE 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser1070) 磷酸化表皮生长因子受体 规格 0.1ml

猪血清 100ml 国产

CHORDC1 英文名称： 含半胱酸和组酸丰富域蛋白1 0.2ml

Anti-phospho-FOXO4 (Ser262) 磷酸化叉头蛋白4Multi-class antibodies规格： 0.1ml

IL-16 大鼠白介素-16Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Defensin Beta 1 防御素β1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Necdin 生长抑制蛋白NDN 规格 0.2ml

Human D-Dimer,D2D ELISA Kit 人D二聚体 96T

SPG7 英文名称： 痉挛性蛋白7/基质细胞粘附调节蛋白 0.2ml