PCR反应鉴定——PCR反应条件:

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

以下列是公司正在热销的产品：

耶纳农球菌TPPP (Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit拉丁属名: Agrococcus jenensis

总状毛霉DPP10 (Dipeptidyl Peptidase X) ELISA Kit拉丁属名: Mucor racemosus

金黄隐球酵母IGFBP-4 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit拉丁属名: Cryptococcus flavescens

杨烂皮壳蕉孢菌AP 13 (Apelin 13) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

杰丁塞伯林德纳氏酵母S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit 拉丁属名: Cyberlindnera jadinii

苏云金芽胞杆菌GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit 用途: 用于抗虫基因的分离和抗虫相关基础研究。

炭疽芽胞杆菌TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) ELISA Kit拉丁属名: anthracis

苏云金芽胞杆菌达尔可他亚种PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

沙雷氏菌属SEP1 (Selenoprotein 1) ELISA Kit拉丁属名: Serratia sp.

三叶草根瘤菌PAF (Platelet Activating Factor) ELISA Kit用途: 与白三叶草共生固氮

栗疫病菌CXCR3 (Chemokine CXC Receptor 3) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

拟囊体侧耳P-PKC (Phospho Protein Kinase C) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

德氏乳杆菌德氏亚种SRP9 (Signal Recognition Particle 9kDa) ELISA Kit 拉丁属名: Lactobacillus  delbrueckii subsp. delbrueckii

总状共头霉（编号83778测序复核为大丽轮枝菌）HA (Hemagglutinin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

根白蚁伞MYL9 (Myosin Light Chain 9, Regulatory) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用
戊糖片球菌探针法荧光定量PCR试剂盒规格CK5+6 英文名称： 细胞角蛋白5+6 0.1ml

Anti-CXCR7/RDC1 细胞表面趋化因子受体7Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Metal ion transporter 拟南介金属离子转运蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Phospho-Bcr(Tyr177) 磷酸化T淋巴细胞受体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PAFR/PTAFR 血小板活化因子受体 规格 0.1ml

ICAM2 Kit Human 人 ICAM-2 / CD102 ELISA配对 ELISA

TNFRSF18 英文名称： 糖皮质激素诱导坏死因子受体 0.2ml

CA XI 英文名称： 碳酸酐酶11 0.2ml

Anti-PAR-1/Thrombin receptor 蛋白酶激活受体-1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Human Cortisol ELISA Kit 人唾液皮质醇Multi-class antibodies规格： 96T

Anti-LRRK2 富亮氨酸重复激酶2Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh KIST/UHMK1 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶KIST(激酶相互作用与相关基因) 规格 0.2ml

HCV-IgM(Human Hepatitis C virus IgM) ELISA Kit 人IgM 96T

phospho-PLB(Ser16+Thr17) 英文名称： 磷酸化磷蛋白 0.1ml

人基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒英文名称：Human Matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA Kit 特价促销

人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒英文名称：Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit 进口/原装

人基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒 英文名称：Human Matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA Kit 进口/分装

人基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒英文名称：Human matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit 特价促销

人基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒英文名称：Human matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit 进口/原装

LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝脏型脂肪酸结合蛋白抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Adenylate Kinase 1/ AK1 腺苷酸激酶-1Multi-class antibodies规格： 0.2ml

CHD1 英文名称： ATP依赖的解旋酶CHD1 0.1ml

Anti-HCG Beta 人绒毛膜激素β亚基单抗Multi-class antibodies规格： 0.1ml

AIRA(Human anti-insulin receptor antibody) ELISA Kit 人抗受体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-IKB alpha 核因子κB抑制蛋白αMulti-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAGEB3 相关抗原B3 规格 0.2ml

BMP-7(Human Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 人骨成型蛋白7 96T

RANK 英文名称： 核转录因子NF-κB受体(核因子kB受体活化因子) 0.1ml