- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3938
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2024-09-20
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3938 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
多杀巴斯德菌探针法荧光定量PCR试剂盒规格 | Pasteurella multocida | LZR3938 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
大肠埃希氏菌ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4) ELISA Kit 拉丁属名: Escherichia coli
嗜氨酸假诺卡氏菌ASGR1 (Asialoglycoprotein Receptor 1) ELISA Kit拉丁属名: Pseudonocardia alaniniphila
禾谷镰孢菌*PS (Phosphatidylserine) ELISA Kit拉丁属名: Fusarium graminearum
嗜酸乳杆菌α Actin (Alpha-Actin) ELISA Kit拉丁属名: Lactobacillus acidophilus
棒曲霉EphA2 (Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus clavatus
枯草芽孢杆菌枯草亚种CDKN2A (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
MarisediminicolaBMP-15 (Bone Morphogenetic Protein 15) ELISA Kit 拉丁属名: Marisediminicola antarctica
黄絮鳞鹅膏菌SPC (Pulmonary Surfactant Associated Protein C) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
环状芽胞杆菌ACA-IgG (Anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus circulans
刺孢小克银汉霉D2D (D-Dimer) ELISA Kit拉丁属名: Cunninghamella echinulata
褐球固氮菌S100A12 (S100 Calcium Binding Protein A12) ELISA Kit拉丁属名: Azotobacter chroococcum
油菜菌核病菌CYP1A2 (Cytochrome P450 1A2) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
皮状假丝酵母DKK2 (Dickkopf Related Protein 2) ELISA Kit 拉丁属名: Candida pelliculosa
粪肠球菌LIFR (Leukemia Inhibitory Factor Receptor) ELISA Kit 拉丁属名: faecalis
白地霉CNTN4 (Contactin 4) ELISA Kit 拉丁属名: Geotrichum candidum
多杀巴斯德菌探针法荧光定量PCR试剂盒规格Anti-Bassoon 锌指蛋白231Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Epiphycan 英文名称: 软骨素蛋白多糖3 0.2ml
CASPASE3凋亡抑制剂 Anti-Z-DEVD-FMK 0.2ml
Anti-TTF-1/FITC 荧光素标记甲状腺核转录因子-1/甲状腺特异增强子结合蛋白IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKK alpha (Tyr463) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α 规格 0.1ml
Trk B 神经生长因子受体的一种(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
人羰基化蛋白(PC)ELISA试剂盒英文名称:Human Protein Carbonyl,PC ELISA Kit 进口/分装
C9orf96 英文名称: 9号染色体开放阅读框96 0.2ml
Anti-Phospho-PLK1 (Ser137) 磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1Multi-class antibodies规格: 0.1ml
GHRP-Ghrelin(Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin) ELISA Kit 人生长激素释放肽ghrelinMulti-class antibodies规格: 96T
Anti-Phospho-Stathmin (Ser16) 磷酸化原癌基因蛋白18Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LAG-3/CD223 淋巴细胞活化基因-3 规格 0.2ml
U S-GH(Human Ultra Sensitive growth hormone) ELISA Kit 人超敏生长激素 96T
PPP2R1B 英文名称: 蛋白质磷酸酶2调节亚基1B 0.2ml
人糖胺聚糖(GAG)ELISA试剂盒英文名称:Human glycosaminoglycan,GAG ELISA Kit特价供应
人糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒英文名称:Human glucoprotein 130,gp130 ELISA Kit 进口/分装
人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA试剂盒英文名称:human glycoprotein 49A,Gp49a ELISA Kit特价供应
人糖化白蛋白(GA)ELISA试剂盒英文名称:Human Glycated Albumin,GA ELISA Kit特价促销
P-cadherin(placental) P-钙粘附分子抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-ATF4/CREB-2 活化转录因子4Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ANTXR1(Tyr382) 磷酸化内皮标志物8 规格 0.1ml
CHCHD1 英文名称: 卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD1 0.1ml
Anti-Phospho-Stathmin (Ser16) 磷酸化原癌基因蛋白18Multi-class antibodies规格: 0.1ml
CAM(Human calmodulin) ELISA Kit 人钙调素Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-Stathmin (Ser38) 磷酸化原癌基因蛋白18Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Lactoferrin 乳铁蛋白 规格 0.1ml
GM-CSF ELISA Kit 大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 96T
PPP2R1A 英文名称: 蛋白质磷酸酶2调节亚基1A 0.2ml