上海联祖生物科技有限公司
产品展厅
双埃柯病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3935
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2024-11-08
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3935
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

英文名称

货号

双埃柯病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

Parechovirus(PeV)

LZR3935

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

水管致黑栖热菌cADPRH/CD38 (Cyclic ADP Hydrolase) ELISA Kit拉丁属名: Thermus scotoductus

爪哇青霉C5c (Complement C5 Convertase) ELISA Kit拉丁属名: Penicillium javanicum

紫色红曲TRH (Thyrotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁属名: Monascus  purpureus

大肠埃希氏菌CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit 拉丁属名: Escherichia coli

酿酒酵母HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces Cerevisiae

芽孢八叠球菌属BFP (Brain Finger Protein) ELISA Kit  拉丁属名: Sporosarcina  sp.

蜡状芽孢杆菌MCP-4/CCL13 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  cereus

美澳型核果褐腐病菌CDK4 (Cyclin Dependent Kinase 4) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

假脐菇MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

枯草芽孢杆菌CLEC4E (C-Type Lectin Domain Family 4 Member E) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis

肉色迷孔菌CDKN3 (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3) ELISA Kit拉丁属名: Daedalea dickinsii

普利茅斯沙雷氏菌AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

鲁考弗美奇酵母BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 拉丁属名: Metschnikowia  reukaufii

柠檬两面神菌NPYR2 (Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit拉丁属名: Janibacter  melonis

深蓝紫色杆菌UCHL1 (Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1) ELISA Kit拉丁属名: Janthinobacterium  lividum
双埃柯病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书AGT 英文名称: 紧张素原 0.1ml

Anti-Aurora A/Aurora B/Aurora C /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠有丝分裂激酶A、B、CIgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

ADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 小鼠抗激素/加压素/精氨酸加压素Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-CCL16/HCC-4/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白16IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh EEF2 真核翻译延长因子2 规格 0.2ml

Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 鱼类超敏C反应蛋白 96T

MRAP2 英文名称: 黑素皮质素2受体辅助蛋白2 0.2ml

C9orf86 英文名称: 9号染色体开放阅读框86 0.2ml

Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干细胞关键蛋白Multi-class antibodies规格: 0.1ml

PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人素D合成酶Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干细胞关键蛋白Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IDH1/Isocitrate dehydrogenase 异柠檬酸脱氢酶1 规格 0.2ml

LPL(Mouse lipoprotein lipase)ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶 96T

PCDH11Y 英文名称: 原钙粘附蛋白11Y 0.2ml

Anti-c-Abl 非受体酪氨酸激酶c-AblMulti-class antibodies规格: 0.1ml

phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594) 英文名称: 磷酸化酪酸蛋白激酶受体B1+B2 0.1ml

酪氨酸激酶C Anti-Trk C 0.2ml

Anti-TREM1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系细胞触发受体1IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IRS-1(Ser307) 磷酸化胰岛素受体底物p-IRS-1/2 规格 0.1ml

BSEP peptide 胆汁酸盐输出泵蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg

Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA试剂盒英文名称:Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISA Kit特价供应

CHAD 英文名称: 富含亮酸软骨蛋白 0.1ml

Anti-Hck 造血细胞激酶Multi-class antibodies规格: 0.2ml

HHC II (uman heparin cofactor II ) ELISA Kit 人肝素辅因子ⅡMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-Phospho-HSP27 (Ser82) 磷酸化热休克蛋白27Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MARVELD1 候选抑制基因MARVELD1 规格 0.2ml

MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 96T

RNF 英文名称: E3泛素蛋白连接酶A 0.2ml

 


联系方式
手机:13482402338
Q Q:
二维码扫描访问