- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3935
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2024-11-08
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3935 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
双埃柯病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书 | Parechovirus(PeV) | LZR3935 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
水管致黑栖热菌cADPRH/CD38 (Cyclic ADP Hydrolase) ELISA Kit拉丁属名: Thermus scotoductus
爪哇青霉C5c (Complement C5 Convertase) ELISA Kit拉丁属名: Penicillium javanicum
紫色红曲TRH (Thyrotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁属名: Monascus purpureus
大肠埃希氏菌CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit 拉丁属名: Escherichia coli
酿酒酵母HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces Cerevisiae
芽孢八叠球菌属BFP (Brain Finger Protein) ELISA Kit 拉丁属名: Sporosarcina sp.
蜡状芽孢杆菌MCP-4/CCL13 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus cereus
美澳型核果褐腐病菌CDK4 (Cyclin Dependent Kinase 4) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
假脐菇MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
枯草芽孢杆菌CLEC4E (C-Type Lectin Domain Family 4 Member E) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis
肉色迷孔菌CDKN3 (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3) ELISA Kit拉丁属名: Daedalea dickinsii
普利茅斯沙雷氏菌AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
鲁考弗美奇酵母BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 拉丁属名: Metschnikowia reukaufii
柠檬两面神菌NPYR2 (Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit拉丁属名: Janibacter melonis
深蓝紫色杆菌UCHL1 (Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1) ELISA Kit拉丁属名: Janthinobacterium lividum
双埃柯病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书AGT 英文名称: 紧张素原 0.1ml
Anti-Aurora A/Aurora B/Aurora C /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠有丝分裂激酶A、B、CIgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
ADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 小鼠抗激素/加压素/精氨酸加压素Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-CCL16/HCC-4/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白16IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EEF2 真核翻译延长因子2 规格 0.2ml
Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 鱼类超敏C反应蛋白 96T
MRAP2 英文名称: 黑素皮质素2受体辅助蛋白2 0.2ml
C9orf86 英文名称: 9号染色体开放阅读框86 0.2ml
Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干细胞关键蛋白Multi-class antibodies规格: 0.1ml
PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人素D合成酶Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干细胞关键蛋白Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IDH1/Isocitrate dehydrogenase 异柠檬酸脱氢酶1 规格 0.2ml
LPL(Mouse lipoprotein lipase)ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶 96T
PCDH11Y 英文名称: 原钙粘附蛋白11Y 0.2ml
Anti-c-Abl 非受体酪氨酸激酶c-AblMulti-class antibodies规格: 0.1ml
phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594) 英文名称: 磷酸化酪酸蛋白激酶受体B1+B2 0.1ml
酪氨酸激酶C Anti-Trk C 0.2ml
Anti-TREM1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠髓系细胞触发受体1IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRS-1(Ser307) 磷酸化胰岛素受体底物p-IRS-1/2 规格 0.1ml
BSEP peptide 胆汁酸盐输出泵蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA试剂盒英文名称:Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISA Kit特价供应
CHAD 英文名称: 富含亮酸软骨蛋白 0.1ml
Anti-Hck 造血细胞激酶Multi-class antibodies规格: 0.2ml
HHC II (uman heparin cofactor II ) ELISA Kit 人肝素辅因子ⅡMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-HSP27 (Ser82) 磷酸化热休克蛋白27Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MARVELD1 候选抑制基因MARVELD1 规格 0.2ml
MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 96T
RNF 英文名称: E3泛素蛋白连接酶A 0.2ml