上海联祖生物科技有限公司
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羊病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3911
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2024-09-20
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3911
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

英文名称

货号

羊病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书

Orf Virus(ORFV)

LZR3911

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

三线镰刀菌PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit用途: 代谢产物

糊精乳杆菌PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit拉丁属名: Lactobacillus dextrinicus

野生金针菇(白色)PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

中华根瘤菌ApoB48 (Apolipoprotein B48) ELISA Kit用途: 在无机盐培养基中以为碳源培养,6天内可在固体培养基上形成透明的水解圈。

根瘤菌hs-CRP (high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit用途: 固氮

黑曲霉cGMP(cyclic guanosine monophosphate)ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus  niger

大肠埃希菌拉丁属名: coli

威林格氏线黑粉菌C3 (Complement Component 3) ELISA Kit拉丁属名: Cryptococcus wieringae

酿酒酵母IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

串珠镰刀菌*cTn-I/TNNI3 (cardiac Troponin I) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

刺毛壳MYO (Myoglobin) ELISA Kit拉丁属名: Chaetomium spinosum

茎点霉属IFN-α (Interferon Alpha) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

渐绿木霉NGF (Nerve Growth Factor) ELISA Kit 拉丁属名: Trichoderma viridescens

棒状杆菌属TCC C5b-9 (Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit拉丁属名: Corynebacterium sp.

多变毛霉PEDF (Pigment Epithelium Derived Factor ) ELISA Kit 拉丁属名: Mucor abundans
羊病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书Calpastatin 英文名称: 钙蛋白酶抑制蛋白 0.1ml

Anti-KLRF1/NKp80 细胞毒性受体NK-p80Multi-class antibodies规格: 0.2ml

P53 人P53蛋白Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-Cullin/C10orf46 CULLINMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh NIK/MAPKKK14 NFkB诱导激酶 规格 0.1ml

Human cyclophilin A,CyPA ELISA Kit 人嗜环蛋白/亲环素A 96T

TNFAIP5 英文名称: 坏死因子α诱导蛋白5 0.1ml

C9orf30 英文名称: 9号染色体开放阅读框30 0.2ml

Anti-PLG 纤维蛋白溶酶原Multi-class antibodies规格: 0.2ml

GKRP(Human glucokinase regulatory protein) ELISA Kit 人葡萄糖激酶调节蛋白Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-MCM2 染色体维持缺陷蛋白2Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh JMJD6 凋亡细胞清除受体 规格 0.2ml

ANG ELISA Kit 大鼠生长素 96T

phospho-PKC Epsilon(Ser729) 英文名称: 磷酸化蛋白激酶C/p-PKC ε 0.1ml

大鼠尿激酶(UK)ELISA试剂盒英文名称:Rat urokinase,UK ELISA Kit进口/分装

Anti-ABCA1/FITC 荧光素标记腺苷三磷酸结合盒转运体A1IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Anti-EDG4/LPA2/FITC 荧光素标记溶血磷脂酸受体蛋白2IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh CTAGE6 CTAGE6蛋白 规格 0.2ml

Melamine/BSA 三聚氰胺与血清白蛋白偶联物 1mg

ZFP103 英文名称: 锌指蛋白103 0.2ml

Rhesus antibody Rh VEGF-D 内皮生长因子D型 规格 0.1ml

CESK1 英文名称: 分子伴侣CESK1蛋白 0.2ml

Anti-BFGFR/FGFR1 碱性成纤维细胞生长因子受体1Multi-class antibodies规格: 0.1ml

PCNA 小鼠增殖细胞核抗原Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-FGF1/AFGF 酸性成纤维细胞生长因子Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rat IgG 小鼠抗大鼠IgG 规格 1mg

Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit 人他克莫司 96T

SH3KBP1 英文名称: SH3结构域激酶结合蛋白1 0.1ml

 


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