上海联祖生物科技有限公司
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豚鼠耳炎诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3901
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2024-09-20
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3901
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

英文名称

货号

豚鼠耳炎诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒

Nocardia otitidiscaviarum

LZR3901

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

大肠埃希氏菌O抗原微量凝集定型血清诊断液PFKM (Phosphofructokinase, Muscle) ELISA Kit规格: 1ml

大肠杆菌AhR (Aryl Hydrocarbon Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Escherichia coli

人参土成对杆菌PLAUR/uPAR (Plasminogen Activator, Urokinase Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Dyadobacter ginsengisoli

白色金针菇IL-20 (Interleukin 20) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

孟氏假单胞菌NUP205 (Nucleoporin 205kDa) ELISA Kit拉丁属名: Pseudomonas mandelii

大肠埃希菌CYP24A1 (Cytochrome P450 24A1) ELISA Kit 拉丁属名: coli

鸡伤寒沙门氏菌GCK (Glucokinase) ELISA Kit拉丁属名: gallinarum

微小杆菌Rabbit GLTP (Glycolipid Transfer Protein) ELISA Kit 拉丁属名: Microvirga sp.

串珠镰孢SEMA4C (Semaphorin 4C) ELISA Kit拉丁属名: Fusarium moniliforme

交替红色杆菌属LMWH (Low Molecular Weight Heparin) ELISA Kit拉丁属名: Altererythrobacter sp.nov.

矮被孢霉BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

金耳OXB (Orexin B) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

酿酒酵母MYO (Myosin) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

豇豆慢生根瘤菌LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit用途: 与花生共生固氮

藤仓镰孢SNRPC (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide C) ELISA Kit 拉丁属名: Fusarium fujikuroi
豚鼠耳炎诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒 C1orf163  1号染色体开放阅读框163抗体

C1orf172  1号染色体开放阅读框172抗体

C1orf2/COTE1  1号染色体开放阅读框2抗体

C1orf19/SEN15  1号染色体开放阅读框19抗体

C1orf25  1号染色体开放阅读框25抗体

C1orf31  1号染色体开放阅读框31抗体

C1orf51  1号染色体开放阅读框51抗体

 


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