客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。

PCR实验方法步骤：

方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

视PCR仪有无热盖，产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。

3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品：

大肠埃希氏菌SCFR/c-Kit (Stem Cell Factor Receptor) ELISA Kit 拉丁属名: Escherichia coli

酿酒酵母SDC1 (Syndecan 1) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae

拟青霉DPP10 (Dipeptidyl Peptidase X) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

葡萄座腔菌属MT1M (Metallothionein 1M) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

黑附球菌SF1 (Steroidogenic Factor 1) ELISA Kit 拉丁属名: Epicoccum nigrum

侧孢短芽孢杆菌PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit拉丁属名: Brevibacillus  laterosporus

总状共头霉MMP-9 (Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

LysinibacillusPON3 (Paraoxonase 3) ELISA Kit拉丁属名: Lysinibacillus  sp.

硬结杆菌MR (Mannose Receptor) ELISA Kit拉丁属名: Arthrobacter scleromae

异常威克汉姆酵母IgA1 (Immunoglobulin A1) ELISA Kit 拉丁属名: Wickerhamomyces anomalus

空肠弯曲杆菌sAC (Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit拉丁属名: jejuni

高山被孢霉ARSA (Arylsulfatase A) ELISA Kit拉丁属名: Mortierella alpina

紫色红曲ANGPTL6 (Angiopoietin Like Protein 6) ELISA Kit 拉丁属名: Monascus  purpureus

pLVX Tre3GEPYC (Epiphycan) ELISA Kit拉丁属名: 宿主：DH5α，BL21

酿酒酵母GAL3 (Galectin 3) ELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces  cerevisiae
新德里超级细菌探针法荧光定量PCR试剂盒说明书EDRF1/C10orf137  红细胞分化相关因子1抗体

FASP1/C21orf45  MaFF相关蛋白抗体

CNTD  细胞周期蛋白N端结构域蛋白1抗体

CNTD2  细胞周期蛋白N端结构域蛋白2抗体

ANGEL1  ANGEL1蛋白抗体

ANGEL2  ANGEL2蛋白抗体

ANKLE2  ANKLE2蛋白抗体