- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3834
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-17
- 更新日期: 2024-09-20
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3834 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
牛分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒规格 | Mycobacterium bovis | LZR3834 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
镰刀菌属EPHA3 (Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
冻土毛霉Anti-Surv (Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
鞘氨盒菌GPI (Glycophosphatidylinositol) ELISA Kit拉丁属名: Sphingopyxis pacificum
宛氏拟青霉CD99 (Cluster of Differentiation 99) ELISA Kit 拉丁属名: Paecilomyces variotii
桦剥管孔菌PMN Elastase (Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
砂单胞菌HO1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit 拉丁属名: Arenimonas manganiresistens
耐寒短杆菌TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit拉丁属名: Brevibacterium frigoritolerans Delaporte and Sasson
粘红酵母C1r (Complement Component 1R) ELISA Kit 拉丁属名: Rhodotorula glutinis (Fresenius) Harrison
红球菌FN (Fibronectin) ELISA Kit拉丁属名: Rhodococcus globerulus
白色短波单胞菌LRP (Lung Resistance-Related Protein) ELISA Kit拉丁属名: Brevundimonas alba
梭菌MUC3 (Mucin 3) ELISA Kit拉丁属名: septicum
燕麦镰孢NUP62 (Nucleoporin 62kDa) ELISA Kit拉丁属名: Fusarium avenaceum
短密青霉FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁属名: Penicillium brevicompactum
鸡枞(鸡菌)β-EP (Beta-Endorphin) ELISA Kit用途: 食、药菌
枯草芽孢杆菌EphA2 (Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus subtilis
牛分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒规格DIP2A/C21orf106 21号染色体开放阅读框106抗体碘化木兰花碱4H-Dibenzo[de,g]quinolinium,5,6,6a,7-tetrahydro-1,11-dihydroxy-2,10-dimethoxy-6,6-dimethyl-, iodide (1:1),(6aS)-中药标准品 分 子 式: C20H24NO4+.I- 分 子 量: 469.31286
MAP-9 微管相关蛋白9抗体间三联苯1,1':3',1''-Terphenyl化学标准品 分 子 式: C18H14 分 子 量: 230.30376
MAP7D1/RPRC1 精氨酸/脯氨酸富含卷曲蛋白1抗体Tokinolide BSpiro[3H-3a,6-ethanoisobenzofuran-4(1H),1'(3'H)-isobenzofuran]-1,3'-dione,3-butylidene-5,6,6',7'-tetrahydro-5-propyl-, (1'S,3Z,3aS,5R,6R)-中药标准品 分 子 式: C24H28O4 分 子 量: 380.47672
MKLP1 有丝分裂驱动蛋白样1抗体7-甲氧基-beta-咔啉-1-丙酸7-Methoxy-b-carboline-1-propionic acid化学标准品 分 子 式: 分 子 量:
NDE1 核分布基因E同源蛋白1抗体杨芽黄素5-Hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one中药标准品 分 子 式: C16H12O4 分 子 量: 268.26408
NEK9 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK9抗体4-β-羟基胆固醇4β-Hydroxy Cholesterol中药标准品 分 子 式: C27H46O2 分 子 量: 402.65294
phospho-NEK9(Thr210) 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK9抗体2-溴联苯2-Bromobiphenyl 高端化学试剂 分 子 式: C12H9Br 分 子 量: 233.10386