- 品牌:联祖
- 产地:进口、国产
- 货号:LZR3828
- 价格: ¥3800/盒
- 发布日期: 2020-11-17
- 更新日期: 2024-09-20
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 联祖 |
货号 | LZR3828 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
包装规格 | 50T |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
非洲分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒供应商 | Mycobacterium africanum | LZR3828 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:
焦瑞身氏溶杆菌TGF-β3 (Transforming Growth Factor β3) ELISA Kit 拉丁属名: Lysobacter ruishenii
冷弯曲菌 MSLN (Mesothelin) ELISA Kit拉丁属名: Psychrobacter sp.
三叶草根瘤菌SDF-1/CXCL12 (Stromal Cell Derived Factor 1) ELISA Kit用途: 与三叶草共生固氮
谢瓦散囊菌GM (Gastric Mucin) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
Winogradskyella multivorans ESF (Erythropoiesis Stimulating Factor) ELISA Kit拉丁属名: Winogradskyella multivorans
黑曲霉dDAVP (1-Desamino-8D-Arginine Vasopressin) ELISA Kit拉丁属名: Aspergillus niger van Tieghem
蜡样芽孢杆菌GPI (Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus cereus
黑姬菇TSP-1 (Thrombospondin-1) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
白橙盖鹅膏菌SIGLEC3 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 3) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
黄溶链霉菌PIINP (Procollagen II N-Terminal ProPeptide) ELISA Kit 拉丁属名: Streptomyces xantholiticus
Sphingomonas yunnanensisCASP10 (Caspase 10) ELISA Kit拉丁属名: Sphingomonas yunnanensis
白僵菌GPC3 (Glypican 3) ELISA Kit 用途: 害虫生物防治
酿酒酵母GT-34 (Gastrin 34) ELISA Kit拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
大肠杆菌MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 用途: 科学研究,功能检测
鲁考弗美奇酵母GTF2F1 (General Transcription Factor IIF, Polypeptide 1) ELISA Kit拉丁属名: Metschnikowia reukaufii
非洲分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒供应商RNF138 环指蛋白138抗体白射干素8H-1,3-Dioxolo[4,5-g][1]benzopyran-8-one,9-hydroxy-7-(3-hydroxy-4,5-dimethoxyphenyl)-化学标准品 分 子 式: C18H14O8 分 子 量: 358.29896
RNF121 环指蛋白121抗体依洛替康3H,15H-Oxepino[3',4':6,7]indolizino[1,2-b]quinoline-3,15-dione,9-chloro-5-ethyl-1,4,5,13-tetrahydro-5-hydroxy-10-methyl-12-[(4-methyl-1-piperidinyl)methyl]-,(5R)-中药标准品 分 子 式: C29H32N3O4Cl 分 子 量: 522.03508
RNF113B 环指蛋白113B抗体Acr-Bis(30%,37.5:1)标准滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
RNF150 环指蛋白150抗体镰叶芹二醇1,9-Heptadecadiene-4,6-diyne-3,8-diol,(3R,8S,9Z)-化学标准品 分 子 式: C17H24O2 分 子 量: 260.37126
RNF165 环指蛋白165抗体鸭脚木碱Oxayohimbanium,3,4,5,6,16,17-hexadehydro-16-(methoxycarbonyl)-19-methyl-, inner salt, (19a,20a)-化学标准品 分 子 式: C21H21N2O3+ 分 子 量: 349.40304
RNF169 环指蛋白169抗体蒜氨酸(S)-3-(Allylsulphinyl)-L-alanine中药标准品 分 子 式: C6H11NO3S 分 子 量: 177.22144
RNF170 环指蛋白170抗体ENT-16βH-贝壳杉烷-17,18-二羧酸ent-kauran-17,19-dioic acid化学标准品 分 子 式: 分 子 量: