上海联祖生物科技有限公司
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马立克氏病病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒供应商
  • 品牌:联祖
  • 产地:进口、国产
  • 货号:LZR3796
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2024-09-20
产品详请
产地 进口、国产
品牌 联祖
货号 LZR3796
用途 公司产品仅用于科研
包装规格 50T
纯度 %
CAS编号
是否进口

客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

产品名称

英文名称

货号

马立克氏病病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒供应商

Marek's Disease Virus(MDV)1

LZR3796

PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR仪有无热盖,产品仅用于科研不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。

3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1


荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:

(1)产品仅用于科研将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。步骤(2)为:待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下列是公司正在热销的产品:

黄孢紫红菇MYL9 (Myosin Light Chain 9, Regulatory) ELISA Kit用途: 属外生菌根菌

齐藤隐球酵母OCT (Ornithine Carbamoyl Transferase) ELISA Kit拉丁属名: Cryptococcus saitoi

寡氧单胞菌PROS (Protein S) ELISA Kit用途: 成膜菌

蜡样芽孢杆菌BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit拉丁属名: Bacillus  cereus

金针菇F39VEGF-B (Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

根瘤菌THRSP (Thyroid Hormone Responsive) ELISA Kit用途: 固氮

红色盐颗粒形菌NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit 拉丁属名: Halogranum rubrum

篱边粘褶菌FE (Ferritin) ELISA Kit拉丁属名: Gloeophyllum sepiarium

松鼠葡萄球菌松鼠亚种MEC/CCL28 (Mucosae Associated Epithelia Chemokine) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用

酮丁梭菌(酮丁杆菌)OTF2B (Octamer Transcription Factor 2B) ELISA Kit拉丁属名: Clostridium acetobutylicum McCoy et al.

酿酒酵母PKD2 (Protein Kinase D2 )NELISA Kit 拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae

黄绿木霉HNRPA2B1 (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A2/B1) ELISA Kit拉丁属名: Trichoderma aureoviride

苏云金芽孢杆菌GP5 (Glycoprotein V, Platelet) ELISA Kit 拉丁属名: Bacillus thuringiensis

蝙蝠蛾拟青霉LATS (Long Acting Thyroid Stimulator) ELISA Kit拉丁属名: Paecilomyces hepiali

5#---3号(梨形灰包)GTEAGE (Glomerular Tissue Extract Advanced Glycosylation End Products) ELISA Kit注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或,非药用,非食用
马立克氏病病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒供应商IQCF1  IQCF1蛋白抗体黄独素DDIOSBULBIN-D化学标准品 分 子 式: C19H20O6 分 子 量: 344.3585

ISLR2  ISLR2蛋白抗体L-阿拉伯糖D-Arabinose化学标准品 分 子 式: C5H10O5 分 子 量: 150.1299

HPRT  次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1抗体鸭脚树叶碱Picrinine中药标准品  分 子 式: C20H22N2O3 分 子 量: 338.40028

SPTLC2  丝氨酸棕榈酰转移酶2抗体莱苞迪甙ARebaudioside A中药标准品  分 子 式: C44H70O23 分 子 量: 967.012800000001

AKAP2  蛋白激酶A2抗体灰毡毛忍冬皂苷甲Macranthoidin A中药标准品  分 子 式: C59H96O27 分 子 量: 1237.38

PAPSS1  腺苷酸硫酸激酶1抗体3,4,5-三甲氧基苯甲酸3,4,5-Trimethoxybenzoic acid其它化学试剂 分 子 式: C10H12O5 分 子 量: 212.19928

PAPSS2  腺苷酸硫酸激酶2抗体胞嘧啶6-Aminopyrimidin-2(1H)-one中药标准品  分 子 式: C4H5N3O 分 子 量: 111.102

 


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