PCR的反应条件：

因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。

◇ 循环次数

根据模板DNA的量以及扩增片段的大小，设定25～30个循环。

如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，则会出现Smear。

◇ Anneal以及Extension

合适的Anneal温度通常在45～68℃之间 (预备实验可2℃间隔进行)。另外，由于在60～68℃间，也有很高的活性, 因此可在此温度范围内设定Anneal-Extension温度, 进行2 Step PCR。Anneal-Extension温度为68℃ 时，每kbp大体可设定30秒～1分钟；当温度设定在68℃以下时, 时间设定可稍长一些。通常，Anneal温度太高，有时会得不到扩增产物；Anneal温度太低时，容易发生非特异性反应。另外，Extension时间太短时，会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成；而Extension时间太长时，会出现Smear。

产品特点：

◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；

◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；

◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，产品仅用于科研可同时进行多个检测；

◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

需要注意：
PCR反应液请在冰中配制，然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法（Cool Start Method）与热启动法（Hot Start Method）相结合，更能有效地减少PCR过程中的非特异性反应，增强PCR扩增的特异性，能得到良好的PCR结果。

特点优势：

    1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。

    3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。

    4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。

    5. 优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。

    6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

使用方法：
注：产品仅用于科研所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。

1.样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

厦门假单胞菌Escherichia coli拉丁属名: Pseudomonas xiamenensis

猴头菌Escherichia coli用途: 食用、药用

卧孔菌Escherichia coli注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

ATCC 10145Escherichia coli拉丁属名: Pseudomonas aeruginosa

产氨短杆菌Escherichia coli拉丁属名: Brevibacterium  ammoniagenes

云南尼阿巴菌Escherichia coli拉丁属名: Niabella yanshanensis

银耳Escherichia coli拉丁属名: Tremella fuciformis

嗜硼芽孢杆菌Escherichia coli拉丁属名: Bacillus boroniphilus

木耳Escherichia coli拉丁属名: Auricularia auricula

黄须腹菌Escherichia coli注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

链霉菌 (烬灰类群)Escherichia coli注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

孟氏假单胞菌Escherichia coli拉丁属名: Pseudomonas  mandelii

淡紫拟青霉Escherichia coli注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或，非药用，非食用

大肠埃希氏菌Escherichia coli拉丁属名: Escherichia coli

黑曲霉Escherichia coli拉丁属名: Aspergillus niger van Tieghem

日本曲霉Escherichia coli拉丁属名: Aspergillus japonicus

解几丁质纤维单胞菌Escherichia coli拉丁属名: Cellulomonas chitinilytica

海岸拟诺卡氏菌Escherichia coli拉丁属名: Nocardiopsis litoralis
猪圆环病毒2型PCR检测试剂盒供应Tergitol-7琼脂/Tergitol-7 Agar大肠菌群的鉴定250克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，RT

中文名称： Tergitol-7琼脂

英文名称： Tergitol-7 Agar

产品规格： BR

包装：250克