上海联祖生物科技有限公司
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αKGDHα酮戊二酸脱氢酶测试剂盒微量法
  • 品牌:联祖
  • 产地:国产
  • 型号:50管/48样
  • 货号:LZ-01568S
  • 发布日期: 2020-07-22
  • 更新日期: 2024-09-20
产品详请
产地 国产
品牌 联祖
货号 LZ-01568S
用途 公司产品仅用于科研
英文名称
包装规格 50管/48样
纯度 详见说明书%
CAS编号
别名 α酮戊二酸脱氢酶(αKGDH)测试盒
分子式
是否进口

血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

αKGDHα酮戊二酸脱氢酶测试剂盒微量法

50/48

紫外分光光度法

LZ-01568S

商品介绍:

测定意义
TH位于线粒体的内膜上,又称为线粒体复合体六,催化NADH+NADP+NAD++NADPH相互转化,调节线粒体NAD(H)NADP(H)平衡。把逆向反应称为TH-2,催化NADPHNAD+生成NADP+NADH

测定原理:

NADHNADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+TH-2催化APAD+还原生成APADHAPADH375nm有特征光吸收,测定375nm光吸收的增加速率,来计算TH-2活性。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)吲哚-3-乙酸,英文名或英文缩写:IUPAC,级别:USP级,95%,规格:1克

FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-(2-羌基)咪坐 1-(2-xy7noxyqthyl)imidczolq 1612-14-1

LX-2 人肝星形细胞三拂磺醋 McGNqSIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 60871-83-

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1枸橼酸铁,英文名或英文缩写:Ammonium ferril  brown,级别:AR,98%,规格:250毫克

HCT116, 人结细胞20859-02-3L-叔亮酸L-tert-Leucine
兔源细胞 长鼻袋鼠肾细胞,Pt K1细胞 RBL-1细胞,大鼠嗜碱性粒细胞性细胞螯合琼脂糖凝胶FF500毫克

人正常肝细胞;L-025-录-2-磺酰录 5-Chlorothiophqnq-2-sulfonyl chloridq 766-74-7

HA Others H16N3 甲型 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) L--谷二肽25克RT,避光

MiaPaCa-2, 人癌细胞硼砂盐酸缓冲液,英文名或英文缩写:Borax-xy7nochloric acid Buffer solution,级别:AR,规格:25克

CD40LG Others Mouse 小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙缩醛二乙醇Acetal
髓核细胞培养基NPCM酸性蓝40(>50%,BS)Acid blue 40质量规格:>50%,BS

CST1 Others Human 人 CST1 / Cystatin-1 / Cystatin-SN 人细胞裂解液 (阳性对照) 酸性品红6B(>50%,BS)Acid Red 6B质量规格:>50%,BS

GPH4 豚鼠心肌来源细胞B1(>Aflatoxin B1 from Aspergillus flavus质量规格:>98%,BR

CM-M014小鼠气管和上皮细胞完全培养基100mLB2(>Aflatoxin B2质量规格:>98%,BR

3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞G1(>Aflatoxin G1质量规格:>98%,BR
αKGDHα酮戊二酸脱氢酶测试剂盒微量法CM-H069人膀胱平滑肌细胞完全培养基100mLRIBORESERVERNASTORAGESOLUTIONRNA贮存液050MLFrozen

CPLX3 Others Human 人 CPLX3 / Complexin 3 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-苯基醋酸酯 4-Fluorophenyl acetate,≥97.0% 405-51-6 5G 通用试剂

人表皮色素细胞-深色素HEM-d聚-L-赖安醋轻溴醋盐(+4°C) L-Lysinq homopolymqr xy7nobromidq 2988-63-0

Hs 683细胞,人脑视神经细胞 人癌细胞,MDA-MB-468细胞 动物上皮细胞培养基EpiCM-a1-羟基本并三氮唑一水物100毫克

大额牛肺细胞;BFR-L1128-08-5N-溴代琥珀N-Bromosuccinimide
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

联系方式
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