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莫氏巴贝斯虫探针法荧光PCR检测试剂盒实验过程
发表时间:2022-09-27
莫氏巴贝斯虫探针法荧光PCR检测试剂盒实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测.
去整合素样金属蛋白酶10抗体
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族9抗体
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族8抗体
植物生长激素ABP1抗体
肌动蛋白相关蛋白1抗体
α红细胞分化相关因子抗体
血管紧张素激活蛋白1抗体
Alpha清蛋白抗体
AFAP1L2抗体
神经细胞分化相关蛋白AHNAK抗体
粘合连接相关蛋白1抗体
去整合素样金属蛋白酶13抗体
聚集蛋白抗体
转录因子AP2α+β抗体
磷酸化腺瘤样息肉抗体
磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体
细胞周期后期促进蛋白亚基10抗体
细胞周期后期促进蛋白亚基11抗体
腺瘤性结肠息肉病蛋白2抗体
磷酸化细胞分裂周期蛋白16抗体
DNA修复酶相互作用蛋白抗体
脂肪细胞膜相关蛋白抗体
载脂蛋白A1结合蛋白抗体抗体
载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物1抗体
载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物2抗体
载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3B抗体