IL-6 鸡白介素6酶联免疫试剂盒操作步骤

IL-6 鸡白介素6酶联免疫试剂盒操作步骤

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。

重组人胰岛素
胱氨酸
鸟嘌呤
阿昔洛韦
利巴韦林
纤维蛋白原
凝血酶
十八种氨基酸(套)
肠膜状明串珠菌（右旋糖酐菌种）
胰激肽原酶（猪胰激肽释放酶）
降纤酶
血清白蛋白（牛）
蛋白低分子量标准（SDS法）
胰蛋白酶
乙酰磷酸二锂盐
磷酸转乙酰化酶
牛胆盐
溶酶小球菌底物
牛血红蛋白
纤维蛋白原（牛血）
纤维蛋白溶酶原（牛血）（牛纤溶酶原）
凝血酶（牛血）
尿激酶
玻璃酸酶
可溶性淀粉
酪蛋白
乳糖发酵培养基
四硫磺酸钠亮绿对照培养基基础
溴化十六烷基三甲胺琼脂对照培养基
哥伦比亚琼脂对照培养基
绿脓菌素测定用对照培养基基础
念珠菌显色对照培养基
沙氏葡萄糖琼脂对照培养基
沙门、志贺菌属琼脂对照培养基
麦康凯琼脂对照培养基
款冬酮
甘露醇氯化钠琼脂对照培养基
胆盐乳糖对照培养基
玫瑰红钠琼脂对照培养基
营养肉汤对照培养基
改良马丁对照培养基
硫乙醇酸盐流体对照培养基
头孢曲松杂质C
反式头孢曲松
阿奇霉素杂质J
青霉胺二硫化物
头孢噻肟系统适用性对照品
氨苄西林系统适用性对照品