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大麦内标准HvPKABA1基因探针法PCR试剂盒反应五要素

发表时间:2022-07-05
大麦内标准HvPKABA1基因探针法PCR试剂盒反应五要素:
产品仅用于科研参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

ATP结合盒转运蛋白2抗体
肌动蛋白结合蛋白LIM蛋白3抗体
酸性钙调蛋白3抗体
磷酸化CD156b抗体
乙醇脱氢酶5抗体
乙醇脱氢酶6抗体
溶血磷脂酰基转移酶5抗体
遗传性失明相关蛋白AIPL1抗体
免疫调节蛋白AIRE抗体
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体
乙醛脱氢酶2型抗体
γ-氨基丁酸醛脱氢酶抗体
衰老相关蛋白5抗体
磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体
釉基质蛋白抗体
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
磷酸化雄激素受体抗体
磷酸化雄激素受体抗体
磷酸化雄激素受体抗体
磷酸化雄激素受体抗体
锚定蛋白重复结构域蛋白激酶ANKK1抗体
磷酸化内收蛋白抗体
膜粘连蛋白11抗体


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