酯化梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒使用方法

酯化梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
 12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
 6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
 3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
 1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

phospho-AQP2(Ser264) 磷酸化水通道蛋白2抗体
AXL 粘附相关激酶抗体
phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703) 磷酸化粘附相关激酶抗体
phospho-AKT1 + AKT2 + AKT3 (Thr308+Thr309+Thr305) 磷酸化蛋白激酶B抗体
phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743) 磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-AKT1(Ser129) 磷酸化蛋白激酶B抗体
phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser198) 磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-ATF4 (Ser245) 磷酸化活化转录因子4抗体
phospho-Androgen Receptor (Ser213) 磷酸化雄激素受体抗体
phospho-Androgen Receptor (Ser650) 磷酸化雄激素受体抗体
phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗体
phospho-AKT1(Thr34) 磷酸化蛋白激酶B抗体
phospho-ATF2(Ser472) 磷酸化活化复制因子2抗体
3-Apr 凋亡相关蛋白3抗体
ATG18 自噬相关蛋白18抗体
ATG4A 自噬相关蛋白4A抗体
APOA4 载脂蛋白A4抗体
ALOX12 12脂氧合酶抗体
Angiotensin III 血管紧张素III抗体