人B7同系物6ELISA试剂盒间接法(检测未知抗体)

人B7同系物6ELISA试剂盒间接法(检测未知抗体)
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。

2、加样：加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)

3、加酶标抗体：于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,*一遍用DDW洗涤。

4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

自备的设备及试剂：
1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2. 单道或多道微量加液器及吸头
3. 稀释样品的EP管
4. 蒸馏水或去离子水
5. 吸水纸
6. 盛放洗液的容器
纤维二糖多粘菌素E（CC）琼脂基础冻干配套试剂
改良纤维二糖多粘菌素B多粘菌素E（mCPC）琼脂基础 冻干配套试剂
多粘菌素B(氯化钠多粘菌素B肉汤冻干配套试剂)
亚碲酸钾(庆大霉素琼脂冻干配套试剂)
亚碲酸钾(四号琼脂冻干配套试剂)
改良纤维二糖多粘菌素B多粘菌素E(mCPC)琼脂基础
3%氯化钠三糖铁琼脂
Cary-Blair氏运送培养基（不含琼脂）
Cary-Blair氏运送培养基
氯化钠多粘菌素B肉汤基础
60g/L氯化钠蛋白胨水(PW)
庆大霉素琼脂
3%氯化钠溶液
我妻氏血琼脂
3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂
碱性琼脂
四号琼脂
TCBS琼脂
缓冲-甘油氯化钠溶液
3%氯化钠碱性蛋白胨水
碱性蛋白胨水
SCDLP液体培养基
营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基）
含铁牛奶培养基
亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)