DNA复制抑制因子抗体的生物素化标记实验要点

DNA复制抑制因子抗体的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

Kelch样蛋白31抗体
Kelch样蛋白32抗体
钾电压阀门通道混合器相关亚家族成员5抗体
TGF-β诱导早期应答基因1抗体
离子通道蛋白Kv1.3抗体
磷酸化KLF5抗体
磷酸化KLF5抗体
特异性钾离子通道蛋白抗体
沉默驱动蛋白KIF4A抗体
ATP敏感钾离子通道蛋白抗体
KIAA1462蛋白抗体
KIAA1549蛋白抗体
基尔曼氏细小病毒VP1/VP2抗体C端
Kelch样蛋白20抗体
激肽释放酶抑制剂抗体
kelch样蛋白7抗体
TWIK相关酸敏感钾离子通道蛋白9抗体
激肽释放酶6抗体
激肽释放酶8抗体
血浆激肽释放酶抗体
磷酸化抑癌蛋白EZH2抗体
组蛋白去甲基化酶JARID1B抗体
硫酸角质素抗体
角质细胞生长因子调节蛋白2抗体
钾离子通道蛋白G蛋白4抗体
钾通道多聚体结构域KCTD18抗体
胞质接头蛋白Keap1
舞蹈症相关蛋白KALRN抗体
细胞内流钾通道蛋白Kir4.1抗体