鸡单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体elisa检测试剂盒操作步骤

鸡单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体elisa检测试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。
飞龙掌血根皮
川木通
川乌
螃蟹甲
前胡(紫花前胡)
羌活(宽叶羌活)
玉叶金花
买麻藤(小叶买麻藤)
甘松
箭根薯
马尿泡
大红袍
儿茶
侧柏叶
喜马拉雅紫茉莉
烈香杜鹃
锁阳
莲须
宽筋藤
槟榔花
沙棘膏
菊苣（毛菊苣）
车前草
连钱草
菊花
水金凤
楤木
蓝布正
云实皮
穿山龙
东风桔
轮环藤根
华佩兰
叶下珠
万丈深
甜茶
绿包藤
白花丹
巢脾
草玉梅
大青叶
瓜子金
洗碗叶
鸡眼睛
肉桂
天花粉
落花生枝叶
一点红
韭菜子