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慢性淋巴细胞白血病缺失基因6蛋白抗体实验步骤

发表时间:2021-09-16

        当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。

慢性淋巴细胞白血病缺失基因6蛋白抗体实验步骤:


1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

准备好试剂与仪器:

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

MN-h, 小鼠海马神经元
MSC, 小鼠雪旺细胞
MA, 小鼠星形胶质细胞
MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞
mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞
CSC, 小鼠心肌细胞
mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞
NSC,大鼠神经干细胞
RN-h, 大鼠海马趾神经元
rEPC,大鼠内皮祖细胞-骨髓
RN-c, 大鼠皮质神经元
RN-s, 大鼠纹状体神经元
RSC, 大鼠雪旺细胞
RA, 大鼠星形胶质细胞
RLF, 大鼠淋巴成纤维细胞
rRTEC, 大鼠肾小管上皮细胞
rCSC, 大鼠心肌细胞
RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞
RLFs, 大鼠肺成纤维细胞
rCF, 大鼠心脏成纤维细胞
MN-h, 小鼠海马神经元
MN-s, 小鼠纹状体神经元
mOPC, 小鼠少突胶质前体细胞
MA, 小鼠星形胶质细胞
MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞
mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞
CSC, 小鼠心肌细胞
小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞
MM, 小鼠小胶质细胞
mCF, 小鼠心脏成纤维细胞
MN-c, 小鼠皮质神经元
 细胞名称
人绒毛膜毛细血管内皮细胞
人羊膜上皮细胞
人绒毛间充质成纤维细胞



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