着丝粒ZW10相互作用蛋白1抗体的生物素化标记实验要点

着丝粒ZW10相互作用蛋白1抗体的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

晚期糖基化终末产物抗体
软骨蛋白聚糖抗体
5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
p53凋亡刺激蛋白1抗体
P53凋亡刺激蛋白2抗体
激活素受体2B抗体
AIMP2抗体
乙酰胆碱酶抗体
5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
防御素α1/3抗体
ABC膜转运蛋白抗体
植物延长蛋白（拟南芥）
A-Raf抗体
磷酸化A-Raf抗体
红细胞腺苷脱氨酶3抗体
雄激素结合蛋白抗体
肝再生增强因子抗体
APP/ABPP淀粉样肽前体蛋白抗体
甲胎蛋白单克隆抗体（包被）
甲胎蛋白单克隆抗体(检测)
ADP核糖基化因子结合蛋白1抗体
芳香烃受体抗体
吸引素抗体
腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体
蛋白激酶B2
血管生成素2抗体
芳香化酶/细胞色素P450/雌激素合成酶抗体