戊二酰辅酶A脱氢酶抗体的生物素化标记实验要点

戊二酰辅酶A脱氢酶抗体的生物素化标记实验要点：
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

人 CD21 ELISA配对抗体
人 CD19 ELISA配对抗体
人 AFP / alpha-fetoprotein ELISA配对抗体
人 REG4 ELISA配对抗体
小鼠 Endoglin / CD105 / ENG ELISA配对抗体
人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 ELISA配对抗体
大鼠 ICAM-1 / CD54 ELISA配对抗体
人 TEM7 / PLXDC1 ELISA配对抗体
小鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 ELISA配对抗体
小鼠 Osteomodulin / OMD ELISA配对抗体
小鼠 IL-13RA1 / CD213a1 ELISA配对抗体
小鼠 IFNAR1 ELISA配对抗体
人 LMAN2 / VIP36 ELISA配对抗体
人 CALML5 ELISA配对抗体
人 alpha-Galactosidase A / GLA ELISA配对抗体
人 Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 ELISA配对抗体
人 EGFR / HER1 / ErbB1 ELISA配对抗体
食蟹猴 CD16 / FCGR3 ELISA配对抗体
人 Cystatin E / CST6 ELISA配对抗体
人 BID ELISA配对抗体
人 VNN2 / Vanin-2 ELISA配对抗体