补体成分C1q受体检测试剂盒实验步骤
发表时间:2021-03-291.从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4.随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100μL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100μL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100μL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90μL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50μL,立即450nm读数。
注意事项:
1. 产品仅用于科研试剂盒应在有效期内使用,请不要使用过期的试剂。
2. 试剂盒未使用时应保存在 2-8℃冰箱,已复溶但未用完的标准品,请丢弃。
3. 试剂盒使用前请在室温恢复 30 min,且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。
4. 在试验中标准品和样本建议作复孔检测,且加入试剂的顺序应保持一致。
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