阿洛夫奥斯特线虫PCR检测试剂盒实验步骤

阿洛夫奥斯特线虫PCR检测试剂盒实验步骤：
①产品仅用于科研取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。

实验禁忌：
1、浓洗涤液可能会有结晶析出，ELISA试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
2、如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数（×5×n）。
3、各步加样均应使用加样器，并经常校对其正确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数目多，推荐使用排枪加样。
4、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5、严格按照说明书的操纵进行，ELISA试剂盒试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
6、从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装进密封袋中保存。
7、所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
8、本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。