小鼠黑色素瘤细胞；B16-F0提取物细胞处理

小鼠黑色素瘤细胞；B16-F0提取物细胞处理：

1)复苏细抱:将会有1mL细胞液的冻存管迅速放入37て水浴中(水回要低于存管盖部)見解点,移入事先准好的含有4mL培养

基的15ml高心管中混合均匀。在1000RPM条件下高心4分钟,弃云上清液,加入1mlL培养基后吹匀。然后将所有细抱悬液移入?有5ml

培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并查细密度。

2）细胞,传代可参考以下方法

方法一:收集细抱,1000RPM,常条件下离心5分钟,?去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细長液按1:2到1:5的比例分到

新的?8m培养基的新皿中或者瓶中

方法ニ:可远择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细抱悬起,将细抱悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8m培养基的新皿

或善瓶

3)细冻存:待细生长状态良好

存上清液(防止细抱吸走),加入部分新年培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在东存管中加入10%DMSO匀后进行冻存。冻存

冻存细抱时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1)细抱冻存培养基是一种用于乳动物细的却用型完全冻存培养基,其所含治牛血清和牛血清例经过优化,可改善细抱活力以及解

冻后的细抱复苏效果。

2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无冻存培养基,?10%DMSO,适用于多种干细抱和原代抱(無色素细胞除外)的